ວິທີການອ່ານຜົນໄດ້ຮັບ Cytometry ໄຫຼ

ແນະນຳ

ເຈົ້າເຄີຍສົງໄສບໍວ່ານັກວິທະຍາສາດວິເຄາະຫຼາຍພັນເຊລໃນເວລາພຽງບໍ່ເທົ່າໃດວິນາທີ? Flow cytometry ແມ່ນເຄື່ອງມືທີ່ມີປະສິດທິພາບທີ່ເຮັດໃຫ້ສິ່ງນີ້ເປັນໄປໄດ້. ມັນອະນຸຍາດໃຫ້ນັກຄົ້ນຄວ້າສຶກສາຄຸນສົມບັດທາງກາຍະພາບແລະທາງເຄມີຂອງແຕ່ລະຈຸລັງໄດ້ໄວແລະຖືກຕ້ອງ.

 

ໃນບົດຄວາມນີ້, ພວກເຮົາຈະຄົ້ນຫາວິທີການອ່ານແລະຕີຄວາມຜົນຂອງ flow cytometry. ທ່ານຈະຮຽນຮູ້ວິທີການກໍານົດເຄື່ອງຫມາຍທີ່ສໍາຄັນ, ປະເມີນສະພາບຂອງພະຍາດ, ແລະໄດ້ຮັບຄວາມເຂົ້າໃຈກ່ຽວກັບການເຮັດວຽກຂອງເຊນ. ຄວາມເຂົ້າໃຈຜົນໄດ້ຮັບເຫຼົ່ານີ້ແມ່ນຈໍາເປັນສໍາລັບການຕັດສິນໃຈທີ່ມີຂໍ້ມູນໃນການຄົ້ນຄວ້າວິທະຍາສາດແລະການປະຕິບັດທາງດ້ານການຊ່ວຍ.

 

ຄວາມເຂົ້າໃຈຜົນໄດ້ຮັບ Cytometry ໄຫຼ

ພື້ນຖານຂອງ Flow Cytometry

Flow cytometry ເຮັດວຽກໂດຍການຖ່າຍທອດຈຸລັງຜ່ານເລເຊີໃນຂະນະທີ່ວັດແທກແສງສະຫວ່າງທີ່ກະແຈກກະຈາຍໂດຍແຕ່ລະເຊນ. ແສງສະຫວ່າງກະແຈກກະຈາຍເຮັດໃຫ້ນັກຄົ້ນຄວ້າຂໍ້ມູນທີ່ສໍາຄັນກ່ຽວກັບຂະຫນາດແລະຄວາມຊັບຊ້ອນພາຍໃນຂອງເຊນ. ນອກຈາກນັ້ນ, ເຄື່ອງຫມາຍ fluorescent ແມ່ນຖືກນໍາໃຊ້ເພື່ອຕິດສະຫຼາກທາດໂປຼຕີນສະເພາະຢູ່ໃນຫຼືພາຍໃນຈຸລັງ, ສະຫນອງຄວາມເຂົ້າໃຈເພີ່ມເຕີມກ່ຽວກັບຄຸນລັກສະນະຂອງຈຸລັງ.

 

Flow cytometers ເກັບກໍາຂໍ້ມູນກ່ຽວກັບການກະແຈກກະຈາຍແສງສະຫວ່າງແລະຕົວກໍານົດການ fluorescence. ຂໍ້ມູນກະແຈກກະຈາຍແສງສະຫວ່າງແມ່ນຖືກສ້າງຂຶ້ນເມື່ອຈຸລັງພົວພັນກັບເລເຊີ, ເຊິ່ງສະຫນອງຂໍ້ມູນກ່ຽວກັບຂະຫນາດແລະໂຄງສ້າງພາຍໃນຂອງພວກເຂົາ. ຂໍ້ມູນນີ້ຊ່ວຍກຳນົດຂະໜາດ ແລະຮູບຮ່າງຂອງເຊວ. ຂໍ້ມູນ fluorescence ແມ່ນເກັບກໍາໃນເວລາທີ່ແທັກ fluorescent ສະເພາະຜູກມັດກັບອົງປະກອບຂອງເຊນເຊັ່ນໂປຣຕີນຫຼື DNA, ເຊິ່ງປ່ອຍແສງສະຫວ່າງຕາມຄວາມຕື່ນເຕັ້ນ. ສັນຍານເຫຼົ່ານີ້ຊ່ວຍກໍານົດເຄື່ອງຫມາຍຂອງເຊນສະເພາະ, ເຊັ່ນ: ທາດໂປຼຕີນຈາກຫນ້າດິນຫຼືເນື້ອໃນ DNA, ເຊິ່ງເປັນສິ່ງສໍາຄັນສໍາລັບການເຂົ້າໃຈພຶດຕິກໍາຂອງເຊນ.

 

ປະເພດຂອງຂໍ້ມູນໃນ Flow Cytometry

● Forward scatter (FSC): ວັດແທກຂະໜາດຂອງເຊລ. ຈຸລັງທີ່ໃຫຍ່ກວ່າມີແນວໂນ້ມທີ່ຈະຜະລິດກະແຈກກະຈາຍໄປຂ້າງຫນ້າຫຼາຍເພາະວ່າພວກມັນ deflect ແສງສະຫວ່າງຫຼາຍ.

● Side scatter (SSC): ຊີ້ບອກເຖິງຄວາມສັບສົນຂອງເຊວ ຫຼືໂຄງສ້າງພາຍໃນ. ພາລາມິເຕີນີ້ໃຫ້ຄວາມເຂົ້າໃຈກ່ຽວກັບ granularity ແລະຄວາມຊັບຊ້ອນຂອງເຊນ, ເຊິ່ງສາມາດເປັນປະໂຫຍດສໍາລັບການຈໍາແນກປະເພດຂອງຈຸລັງຫຼືກວດພົບຄວາມຜິດປົກກະຕິ.

● ພາລາມິເຕີ fluorescence: ເຫຼົ່ານີ້ວັດແທກຄວາມເຂັ້ມຂອງ fluorescence ສະເພາະທີ່ປ່ອຍອອກມາຈາກ antibodies, ສີຍ້ອມ, ຫຼືທາດໂປຼຕີນ. ໂດຍການວັດແທກ fluorescence ຂອງເຄື່ອງຫມາຍຫຼາຍ, cytometry ໄຫຼສາມາດກໍານົດອົງປະກອບຂອງເຊນສະເພາະ, ເຊັ່ນ receptors ໂດຍສະເພາະ, DNA, ຫຼືທາດໂປຼຕີນ, ຂຶ້ນກັບເປົ້າຫມາຍຂອງການທົດລອງ.

 

ພາລາມິເຕີ	ລາຍລະອຽດ	ການນໍາໃຊ້
Forward Scatter (FSC)	ວັດແທກຂະຫນາດຂອງເຊນ. ຈຸລັງຂະຫນາດໃຫຍ່ກະແຈກກະຈາຍແສງສະຫວ່າງຫຼາຍຂຶ້ນ.	ກຳນົດຂະໜາດຂອງເຊລ.
Side Scatter (SSC)	ວັດແທກຄວາມຊັບຊ້ອນພາຍໃນ ຫຼື granularity ຂອງເຊລ.	ຊ່ວຍປະເມີນຄວາມຊັບຊ້ອນຂອງເຊນ ຫຼືໂຄງສ້າງ.
ດອກໄຟ	ມາດຕະການປ່ອຍແສງຈາກເຄື່ອງໝາຍຕິດປ້າຍ.	ລະບຸອົງປະກອບເຊນສະເພາະເຊັ່ນ: ໂປຣຕີນ ຫຼື DNA.

 

ການສະແດງຮູບພາບທີ່ສໍາຄັນໃນ Flow Cytometry

ຮິສໂຕແກຣມ

Histograms ເປັນວິທີທີ່ກົງໄປກົງມາເພື່ອສະແດງຂໍ້ມູນພາລາມິເຕີດຽວໃນ cytometry ໄຫຼ. ໂດຍປົກກະຕິພວກມັນສະແດງຄວາມເຂັ້ມຂອງກະແຈກກະຈາຍຂອງແສງ ຫຼື fluorescence ໃນແກນ x, ໃນຂະນະທີ່ແກນ y ສະແດງເຖິງຈໍານວນຂອງເຫດການ (ຈຸລັງ). ການສະແດງກຣາຟຟິກແບບງ່າຍໆນີ້ຈະຊ່ວຍໃຫ້ເຂົ້າໃຈການແຈກຢາຍຕົວກໍານົດການດຽວໃນທົ່ວປະຊາກອນຂອງເຊລໄດ້ງ່າຍຂຶ້ນ.

 

ໃນ histograms, ທ່ານສາມາດສັງເກດເຫັນ:

● ການປ່ຽນແປງໃນຈຸດສູງສຸດ: ການປ່ຽນໄປທາງຂວາຂອງຄວາມເຂັ້ມ fluorescence ໂດຍປົກກະຕິຊີ້ໃຫ້ເຫັນເຖິງການເພີ່ມຂື້ນຂອງການສະແດງຜົນຂອງເຄື່ອງຫມາຍເປົ້າຫມາຍ. ນີ້ແມ່ນຕົວຊີ້ວັດທີ່ເປັນປະໂຫຍດຂອງການປ່ຽນແປງການສະແດງອອກຂອງທາດໂປຼຕີນ, ເຊັ່ນ: ໃນການຕອບສະຫນອງຕໍ່ການປິ່ນປົວ.

● ການແຜ່ກະຈາຍສູງສຸດ: ການແຜ່ກະຈາຍຂອງຈຸດສູງສຸດໃຫ້ຄວາມເຂົ້າໃຈກ່ຽວກັບການປ່ຽນແປງຂອງການສະແດງອອກຂອງເຄື່ອງຫມາຍໃນທົ່ວປະຊາກອນຈຸລັງ. ຈຸດສູງສຸດທີ່ກວ້າງກວ່າອາດຈະຊີ້ໃຫ້ເຫັນເຖິງປະຊາກອນທີ່ມີຄວາມຫຼາກຫຼາຍທີ່ມີລະດັບການສະແດງອອກທີ່ແຕກຕ່າງກັນ, ໃນຂະນະທີ່ຈຸດສູງສຸດທີ່ແຄບຊີ້ໃຫ້ເຫັນເຖິງຄວາມເປັນເອກະພາບ.

 

Dot Plots ແລະ Scatter Plots

ແຜນຜັງຈຸດ, ເຊິ່ງເອີ້ນກັນວ່າ ແຜ່ນກະແຈກກະຈາຍ, ແມ່ນໃຊ້ທົ່ວໄປເພື່ອສະແດງຂໍ້ມູນສອງພາລາມິເຕີ. ແຜນຜັງເຫຼົ່ານີ້ຊ່ວຍໃຫ້ທ່ານສາມາດສັງເກດເຫັນຄວາມສໍາພັນລະຫວ່າງສອງຕົວກໍານົດການທີ່ແຕກຕ່າງກັນ, ເຊັ່ນ: ກະແຈກກະຈາຍໄປຂ້າງຫນ້າ (FSC) ແລະກະແຈກກະຈາຍຂ້າງ (SSC), ຫຼືລະຫວ່າງເຄື່ອງຫມາຍ fluorescence. ໂດຍການນຳໃຊ້ຈຸດ, ທ່ານສາມາດວິເຄາະຄວາມສຳພັນລະຫວ່າງຫຼາຍພາລາມິເຕີໃນການສະແດງພາບດຽວ.

 

● Gating: ໃນຈຸດໆ, ທ່ານສາມາດນຳໃຊ້ປະຕູຮົ້ວ (ສີ່ຫຼ່ຽມ, ວົງມົນ, ຫຼື polygons) ເພື່ອແຍກຈຸລັງຍ່ອຍສະເພາະເພື່ອວິເຄາະເພີ່ມເຕີມ. Gating ຊ່ວຍໃຫ້ທ່ານສາມາດສຸມໃສ່ປະຊາກອນທີ່ຕອບສະຫນອງເງື່ອນໄຂສະເພາະໃດຫນຶ່ງ, ເຊັ່ນ: ຂະຫນາດ, granularity, ຫຼືການສະແດງອອກຂອງເຄື່ອງຫມາຍ.

● ການວິເຄາະຫຼາຍພາລາມິເຕີ: ແຜນຜັງຈຸດຊ່ວຍສະແດງພາບຄວາມສຳພັນລະຫວ່າງຕົວແປສອງຕົວ ຫຼືຫຼາຍກວ່ານັ້ນ, ຊ່ວຍໃຫ້ທ່ານຈຳແນກລະຫວ່າງປະຊາກອນເຊວຕ່າງໆ ໂດຍອີງໃສ່ຫຼາຍເກນ, ເຊັ່ນ: ເຄື່ອງໝາຍ ຫຼືລັກສະນະກະແຈກກະຈາຍ. ນີ້ແມ່ນເປັນປະໂຫຍດໂດຍສະເພາະໃນເວລາທີ່ຈັດການກັບປະຊາກອນຈຸລັງທີ່ສະລັບສັບຊ້ອນຫຼື heterogeneous.

 

Gating ຍຸດທະສາດເພື່ອກໍານົດປະຊາກອນຈຸລັງ

ເຕັກນິກການປະຕູຮົ້ວ	ລາຍລະອຽດ	ໃຊ້ກໍລະນີ
ປະຕູຮົ້ວສີ່ຫຼ່ຽມ	ແບ່ງດິນຕອນອອກເປັນສີ່ສີ່ຫຼ່ຽມ.	ເປັນປະໂຫຍດສໍາລັບການວິເຄາະສອງຕົວກໍານົດການ (ເຊັ່ນ: FSC vs SSC).
Polygon Gating	ສ້າງຮູບຮ່າງແບບກຳນົດເອງເພື່ອລວມເອົາຈຸດຂໍ້ມູນທີ່ຫຼາກຫຼາຍຂຶ້ນ.	ເໝາະສຳລັບປະຊາກອນທີ່ຊັບຊ້ອນ ຫຼືຮູບຮ່າງບໍ່ສະໝໍ່າສະເໝີ.
Ellipse Gating	ຄ້າຍກັບສີ່ຫຼ່ຽມແຕ່ສ້າງເປັນຮູບຮີ.	ມີປະສິດທິພາບສໍາລັບປະຊາກອນທີ່ບໍ່ມີສູນກາງ.

 

ການແນະນໍາກ່ຽວກັບ Gating

Gating ເປັນເຕັກນິກທີ່ສໍາຄັນໃນ flow cytometry ທີ່ອະນຸຍາດໃຫ້ທ່ານສາມາດກໍານົດແລະແຍກປະຊາກອນຈຸລັງສະເພາະຈາກຕົວຢ່າງຂະຫນາດໃຫຍ່. ໂດຍການນໍາໃຊ້ປະຕູໄປຫາຂໍ້ມູນ cytometry ການໄຫຼຂອງທ່ານ, ທ່ານສາມາດສຸມໃສ່ຈຸລັງທີ່ສະແດງຄຸນລັກສະນະສະເພາະ, ເຊັ່ນ: ຂະຫນາດ, ຄວາມສັບສົນ, ຫຼືເຄື່ອງຫມາຍການສະແດງອອກ.

 

ໂດຍທົ່ວໄປແລ້ວຂະບວນການອອກປະຕູປະກອບມີ:

● ການເລືອກປະຊາກອນ: Gates ຊ່ວຍໃຫ້ທ່ານແຍກຈຸລັງຍ່ອຍສະເພາະໂດຍອີງຕາມລັກສະນະທີ່ຮູ້ຈັກ. ຕົວຢ່າງ, ທ່ານສາມາດເຂົ້າໄປຫາຈຸລັງທີ່ເປັນບວກສໍາລັບເຄື່ອງຫມາຍສະເພາະ (ເຊັ່ນ: CD3 ສໍາລັບຈຸລັງ T) ຫຼືຢູ່ໃນຈຸລັງທີ່ມີຄຸນສົມບັດກະແຈກກະຈາຍສະເພາະ.

● ບໍ່ລວມເອົາປະຊາກອນທີ່ບໍ່ຕ້ອງການ: Gates ຍັງຊ່ວຍໃຫ້ທ່ານຍົກເວັ້ນອະນຸພາກທີ່ບໍ່ຕ້ອງການເຊັ່ນ: ຈຸລັງຕາຍຫຼືສິ່ງເສດເຫຼືອທີ່ອາດຈະບິດເບືອນການວິເຄາະຂອງທ່ານ. ນີ້ຮັບປະກັນວ່າຂໍ້ມູນທີ່ທ່ານວິເຄາະແມ່ນຖືກຕ້ອງແລະກ່ຽວຂ້ອງກັບການຄົ້ນຄວ້າຂອງທ່ານ.

 

ວິທີການນໍາໃຊ້ Gating ເພື່ອການກັ່ນຕອງປະຊາກອນ

ເພື່ອຕີຄວາມຫມາຍຂໍ້ມູນ cytometry ການໄຫຼເຂົ້າຢ່າງມີປະສິດທິພາບ, ມັນເປັນສິ່ງຈໍາເປັນທີ່ຈະກໍານົດປະຕູທີ່ເຫມາະສົມທີ່ສຸມໃສ່ປະຊາກອນທີ່ມີຄວາມສົນໃຈ. ຕົວຢ່າງ:

● ບໍ່ລວມເອົາເຊລທີ່ຕາຍແລ້ວ: ຈຸລັງທີ່ຕາຍແລ້ວມັກຈະສະແດງຄຸນສົມບັດກະແຈກກະຈາຍທີ່ເປັນເອກະລັກ, ເຊິ່ງສາມາດໃຊ້ເພື່ອຈໍາແນກພວກມັນອອກຈາກເຊລທີ່ມີຊີວິດໄດ້. ໂດຍການເຂົ້າຫາຕົວກະແຈກກະຈາຍໄປຂ້າງຫນ້າ (FSC) ແລະກະແຈກກະຈາຍດ້ານຂ້າງ (SSC), ທ່ານສາມາດຍົກເວັ້ນຈຸລັງທີ່ຕາຍແລ້ວຫຼື apoptotic ທີ່ອາດຈະເຮັດໃຫ້ຂໍ້ມູນຂອງທ່ານສັບສົນ.

● ການແຍກປະຊາກອນສະເພາະ: Gating ຊ່ວຍໃຫ້ທ່ານສາມາດເລືອກ ແລະວິເຄາະສ່ວນຍ່ອຍສະເພາະຂອງເຊັລໂດຍອີງໃສ່ເຄື່ອງໝາຍ ຫຼື ລັກສະນະທາງກາຍະພາບ. ສໍາລັບຕົວຢ່າງ, ທ່ານສາມາດເຂົ້າໄປໃນຈຸລັງ T ໂດຍການກໍານົດເປົ້າຫມາຍຂອງທາດໂປຼຕີນຈາກຫນ້າດິນສະເພາະ (ເຊັ່ນ: CD3) ແລະຫຼັງຈາກນັ້ນວິເຄາະການສະແດງອອກຂອງເຂົາເຈົ້າຂອງເຄື່ອງຫມາຍອື່ນ (ຕົວຢ່າງ, ລະດັບ cytokine).

 

ການວິເຄາະ Cytometry ຂັ້ນສູງ

Multicolor Flow Cytometry

Multicolor flow cytometry ແມ່ນເຕັກນິກຂັ້ນສູງທີ່ກ່ຽວຂ້ອງກັບການໃຊ້ເຄື່ອງໝາຍ fluorescent ຫຼາຍອັນເພື່ອວິເຄາະເຄື່ອງໝາຍເຊວຕ່າງໆພ້ອມກັນໃນຕົວຢ່າງດຽວ. ວິທີການນີ້ຊ່ວຍເພີ່ມຄວາມສາມາດໃນການຈໍາແນກລະຫວ່າງປະເພດເຊນແລະປະເພດຍ່ອຍພາຍໃນການປະສົມທີ່ຊັບຊ້ອນຂອງຈຸລັງ.

 

● ຂໍ້ດີ: ປະໂຫຍດຫຼັກຂອງ multicolor flow cytometry ແມ່ນວ່າມັນຊ່ວຍໃຫ້ການວິເຄາະພາລາມິເຕີຫຼາຍອັນພ້ອມກັນໄດ້, ເຮັດໃຫ້ການທົດລອງມີປະສິດທິພາບຫຼາຍຂຶ້ນ. ນີ້ແມ່ນເປັນປະໂຫຍດໂດຍສະເພາະໃນເວລາທີ່ທ່ານຕ້ອງການກວດກາເຄື່ອງຫມາຍຈໍານວນຫນຶ່ງກ່ຽວກັບປະຊາກອນຈຸລັງດຽວ.

● ການຕີຄວາມໝາຍຜົນໄດ້ຮັບຫຼາຍສີ: ແຕ່ລະເຄື່ອງໝາຍໃນ cytometry flow multicolor ແມ່ນຕື່ນເຕັ້ນໂດຍຄວາມຍາວຄື້ນສະເພາະຂອງແສງ, ຊ່ວຍໃຫ້ມີຄວາມແຕກຕ່າງທີ່ຊັດເຈນລະຫວ່າງປະເພດ ຫຼືລັດຕ່າງໆ. ອັນນີ້ມີປະໂຫຍດໂດຍສະເພາະໃນການສ້າງຈຸລັງພູມຄຸ້ມກັນ, ການຄົ້ນຄວ້າມະເຮັງ, ແລະພື້ນທີ່ອື່ນໆທີ່ຕ້ອງວິເຄາະເຄື່ອງໝາຍຫຼາຍອັນພ້ອມກັນ.

 

ປະເພດເຄື່ອງໝາຍ	ໃຊ້ fluorochrome	ຄໍາຮ້ອງສະຫມັກທົ່ວໄປ
CD3 (T cells)	FITC, PE, APC	ການກໍານົດ T lymphocytes ໃນໂປຣໄຟລ໌ພູມຕ້ານທານ.
CD4 (ຕົວຊ່ວຍ T cells)	PerCP-Cy5.5, APC	ການກໍານົດຕົວຊ່ວຍ T cells ສໍາລັບການເຮັດວຽກຂອງພູມຕ້ານທານ.
CD8 (Cytotoxic T cells)	PE, APC, BV421	ການກໍານົດຈຸລັງ T cytotoxic ໃນການຕອບສະຫນອງຂອງພູມຕ້ານທານ.
CD19 (ເຊລ B)	FITC, PE, PerCP	ການສ້າງຈຸລັງ B ໃນການສຶກສາດ້ານພູມຄຸ້ມກັນແລະ leukemia.

 

U ຮ້ອງ PCA, SPADE, ແລະ tSNE ສໍາລັບຂໍ້ມູນຊັບຊ້ອນ

ຂໍ້ມູນ cytometry ກະແສມັກຈະກ່ຽວຂ້ອງກັບພາລາມິເຕີຫຼາຍອັນ, ເຊິ່ງສາມາດສົ່ງຜົນໃຫ້ຊຸດຂໍ້ມູນທີ່ມີມິຕິລະດັບສູງ. ເພື່ອວິເຄາະຊຸດຂໍ້ມູນຊັບຊ້ອນເຫຼົ່ານີ້ຢ່າງມີປະສິດທິພາບ, ນັກຄົ້ນຄວ້ານຳໃຊ້ເຕັກນິກການວິເຄາະຂໍ້ມູນຂັ້ນສູງ:

● ການວິເຄາະອົງປະກອບຫຼັກ (PCA): PCA ແມ່ນວິທີການສະຖິຕິທີ່ໃຊ້ເພື່ອຫຼຸດຂະໜາດຂອງຊຸດຂໍ້ມູນຂະໜາດໃຫຍ່ ໃນຂະນະທີ່ເກັບຂໍ້ມູນຫຼາຍເທົ່າທີ່ເປັນໄປໄດ້. ມັນຊ່ວຍໃນການກໍານົດຮູບແບບແລະຄວາມສໍາພັນລະຫວ່າງຕົວແປຫຼາຍ, ເຮັດໃຫ້ມັນງ່າຍຂຶ້ນໃນການເບິ່ງເຫັນຂໍ້ມູນສະລັບສັບຊ້ອນ.

● SPADE (Spanning-tree Progression Analysis of Density-normalized Events): SPADE ແມ່ນເຕັກນິກທີ່ໃຊ້ໃນການວິເຄາະຊຸດຂໍ້ມູນຂະໜາດໃຫຍ່ໂດຍເນັ້ນໃສ່ກຸ່ມຍ່ອຍຂອງເຊລພາຍໃນປະຊາກອນທີ່ຫຼາກຫຼາຍຊະນິດ. ວິທີການນີ້ຊ່ວຍໃຫ້ນັກຄົ້ນຄວ້າສຶກສາການເຄື່ອນໄຫວຂອງປະຊາກອນຈຸລັງໃນໄລຍະເວລາຫຼືຕອບສະຫນອງຕໍ່ການປິ່ນປົວ.

● tSNE (t-Distributed Stochastic Neighbor Embedding): tSNE ເປັນສູດການຄິດໄລ່ທີ່ໃຊ້ເພື່ອຫຼຸດຂະໜາດຂອງຂໍ້ມູນ, ເຮັດໃຫ້ມັນງ່າຍຂຶ້ນໃນການເບິ່ງເຫັນຄວາມສຳພັນລະຫວ່າງເຊລໃນພື້ນທີ່ມິຕິລະດັບສູງ. ນີ້ແມ່ນເປັນປະໂຫຍດໂດຍສະເພາະສໍາລັບການຈັດກຸ່ມຈຸລັງທີ່ມີລັກສະນະຄ້າຍຄືກັນ.

 

ເຕັກນິກຂັ້ນສູງເຫຼົ່ານີ້ເຮັດໃຫ້ນັກຄົ້ນຄວ້າສາມາດສະກັດຄວາມເຂົ້າໃຈທີ່ມີຄວາມຫມາຍຈາກຂໍ້ມູນ cytometry ການໄຫຼເຂົ້າທີ່ສັບສົນແລະສ້າງຄວາມສະດວກໃນການຕີຄວາມຫມາຍຂອງຊຸດຂໍ້ມູນຂະຫນາດໃຫຍ່.

 

ການຕີຄວາມໝາຍຜົນໄດ້ຮັບ

ການກໍານົດສຸຂະພາບດີທຽບກັບຈຸລັງຜິດປົກກະຕິ

Flow cytometry ຖືກນໍາໃຊ້ຢ່າງກວ້າງຂວາງໃນການຕັ້ງຄ່າທາງດ້ານຄລີນິກເພື່ອກວດຫາຄວາມຜິດປົກກະຕິໃນຈຸລັງ, ເຊັ່ນ: ໃນການວິນິດໄສມະເຮັງ. ໂດຍການປຽບທຽບຮູບແບບ fluorescence ແລະກະແຈກກະຈາຍ, ທ່ານສາມາດແຍກຄວາມແຕກຕ່າງລະຫວ່າງຈຸລັງທີ່ມີສຸຂະພາບດີແລະລັກສະນະທີ່ຜິດປົກກະຕິ.

 

ຕົວຢ່າງ:

● ການກວດຫາມະເຮັງ: ໃນ oncology, flow cytometry ຖືກນໍາໃຊ້ໂດຍທົ່ວໄປເພື່ອກໍານົດຈຸລັງມະເຮັງໂດຍການຊອກຫາເຄື່ອງຫມາຍທີ່ສະເພາະຫນ້າຫຼືການປ່ຽນແປງຂອງເນື້ອໃນ DNA ທີ່ເປັນປົກກະຕິຂອງຈຸລັງມະເຮັງ.

● ການສ້າງໂປຣໄຟລຂອງຈຸລັງພູມຄຸ້ມກັນ: Flow cytometry ຍັງສາມາດຖືກນໍາໃຊ້ເພື່ອວິເຄາະຈຸລັງພ

 

ຄວາມເຂົ້າໃຈກ່ຽວກັບການຄວບຄຸມທາງບວກແລະທາງລົບ

ເພື່ອຮັບປະກັນຄວາມຖືກຕ້ອງຂອງຜົນໄດ້ຮັບຂອງທ່ານ, ມັນເປັນສິ່ງຈໍາເປັນທີ່ຈະລວມເອົາການຄວບຄຸມທາງບວກແລະທາງລົບທີ່ເຫມາະສົມໃນການທົດລອງຂອງທ່ານ:

● ການຄວບຄຸມທາງບວກ: ຕົວຢ່າງທີ່ຄວນສະແດງການສະແດງອອກຂອງເຄື່ອງຫມາຍສະເພາະ, ໃຫ້ແນ່ໃຈວ່າການວິເຄາະເຮັດວຽກຕາມທີ່ຄາດໄວ້.

● ການຄວບຄຸມທາງລົບ: ຕົວຢ່າງທີ່ບໍ່ຄວນສະແດງເຄື່ອງຫມາຍການສະແດງອອກ, ຊ່ວຍໃຫ້ການກວດສອບການ fluorescence ພື້ນຫລັງຫຼືການຜູກມັດທີ່ບໍ່ແມ່ນສະເພາະ.

 

ການຄວບຄຸມແມ່ນສໍາຄັນສໍາລັບການກວດສອບຄວາມຖືກຕ້ອງຂອງຂໍ້ມູນຂອງທ່ານແລະໃຫ້ແນ່ໃຈວ່າຜົນໄດ້ຮັບທີ່ສັງເກດເຫັນແມ່ນສະທ້ອນໃຫ້ເຫັນຢ່າງແທ້ຈິງຂອງປະກົດການທາງຊີວະພາບທີ່ທ່ານກໍາລັງສຶກສາ.

 

ຄໍາແນະນໍາພາກປະຕິບັດສໍາລັບການແປຂໍ້ມູນ Flow Cytometry

ປະກອບມີການຄວບຄຸມທີ່ເຫມາະສົມ

ລວມທັງການຄວບຄຸມໃນການທົດລອງ cytometry ການໄຫຼຂອງທ່ານເປັນສິ່ງຈໍາເປັນສໍາລັບການໄດ້ຮັບຂໍ້ມູນທີ່ຖືກຕ້ອງ. ການ​ຄວບ​ຄຸມ​ຊ່ວຍ​ໃຫ້​:

● ກວດສອບປະສິດທິພາບຂອງເຄື່ອງໝາຍ fluorescent ທີ່ນຳໃຊ້.

● ຮັບປະກັນວ່າ fluorescence ທີ່ສັງເກດໄດ້ສະເພາະກັບເຊລເປົ້າໝາຍ ແລະບໍ່ແມ່ນຍ້ອນວັດຖຸທົດລອງ ຫຼືການຜູກມັດທີ່ບໍ່ສະເພາະ.

 

ເຂົ້າໃຈການອອກແບບທົດລອງ

ການທົດລອງທີ່ໄດ້ຮັບການອອກແບບມາດີແມ່ນສໍາຄັນສໍາລັບການຮັບປະກັນວ່າຂໍ້ມູນທີ່ທ່ານເກັບກໍານັ້ນມີຄວາມຫມາຍແລະສາມາດແຜ່ພັນໄດ້. ພິຈາລະນາສິ່ງຕໍ່ໄປນີ້ເມື່ອອອກແບບການທົດລອງຂອງເຈົ້າ:

● ການກະກຽມຕົວຢ່າງ: ການຈັດການຕົວຢ່າງທີ່ເຫມາະສົມແມ່ນຈໍາເປັນເພື່ອຫຼຸດຜ່ອນການປ່ຽນແປງ. ສໍາລັບຕົວຢ່າງ, ການຮັບປະກັນວ່າຈຸລັງຂອງທ່ານຢູ່ໃນການລະງັບເຊນດຽວແມ່ນສໍາຄັນສໍາລັບການວິເຄາະທີ່ຖືກຕ້ອງ.

● ການອອກແບບແຜງ: ການເລືອກເຄື່ອງໝາຍ ແລະ fluorochromes ຄວນອີງໃສ່ເປົ້າໝາຍຂອງການທົດລອງ. ຕົວຢ່າງ, ຖ້າທ່ານສົນໃຈໃນການວິເຄາະປະຊາກອນຂອງຈຸລັງພູມຕ້ານທານ, ເລືອກເອົາເຄື່ອງຫມາຍທີ່ກໍານົດສະເພາະຂອງ T cell ທີ່ແຕກຕ່າງກັນ.

 

ສະຫຼຸບ

ການອ່ານແລະການຕີຄວາມຜົນຂອງ flow cytometry ຮຽກຮ້ອງໃຫ້ມີຄວາມເຂົ້າໃຈຢ່າງຈະແຈ້ງກ່ຽວກັບເຕັກໂນໂລຢີ, ວິທີການ, ແລະສະພາບການທາງຊີວະພາບ. ໂດຍການຮຽນຮູ້ພື້ນຖານ cytometry ກະແສ, ການວິເຄາະຂໍ້ມູນຂັ້ນສູງ, ແລະການອອກແບບທົດລອງທີ່ເຫມາະສົມ, ທ່ານສາມາດໄດ້ຮັບຄວາມເຂົ້າໃຈທີ່ມີຄຸນຄ່າທີ່ຊຸກຍູ້ການຄົ້ນພົບທາງວິທະຍາສາດແລະແຈ້ງການຕັດສິນໃຈທາງດ້ານຄລີນິກ. ບໍ່ວ່າຈະເປັນການເຮັດວຽກໃນການຄົ້ນຄວ້າມະເຮັງ, ພູມຄຸ້ມກັນ, ຫຼືການວິນິດໄສ, ການຕີຄວາມຂໍ້ມູນຂອງ cytometry ໄຫຼແມ່ນເປັນສິ່ງຈໍາເປັນສໍາລັບການຕັດສິນໃຈທີ່ມີຂໍ້ມູນທີ່ຈະນໍາໄປສູ່ການປິ່ນປົວທີ່ດີກວ່າແລະການປັບປຸງຜົນໄດ້ຮັບຂອງຄົນເຈັບ. ສໍາລັບຜູ້ທີ່ຊອກຫາເພື່ອເສີມຂະຫຍາຍການຄົ້ນຄວ້າຂອງເຂົາເຈົ້າຫຼືການວິເຄາະທາງດ້ານການຊ່ວຍ, ຜະລິດຕະພັນຈາກ HKeybio ສະເຫນີວິທີແກ້ໄຂທີ່ເປັນເອກະລັກເພື່ອກ້າວຫນ້າຄໍາຮ້ອງສະຫມັກ cytometry ໄຫຼ, ສະຫນອງເຄື່ອງມືທີ່ມີຄຸນຄ່າສໍາລັບການຕີຄວາມຂໍ້ມູນຊັດເຈນແລະການວິເຄາະເຊນ.

 

FAQ

Q: Flow Cytometry ແມ່ນຫຍັງ?

A: Flow cytometry ແມ່ນເຕັກນິກທີ່ໃຊ້ໃນການວິເຄາະຄຸນສົມບັດທາງກາຍະພາບ ແລະທາງເຄມີຂອງຈຸລັງ ຫຼືອະນຸພາກໂດຍການຖ່າຍທອດພວກມັນຜ່ານເລເຊີ. ມັນວັດແທກການກະແຈກກະຈາຍຂອງແສງສະຫວ່າງແລະ fluorescence ເພື່ອລວບລວມຂໍ້ມູນຂະຫນາດ, ຄວາມສັບສົນ, ແລະເຄື່ອງຫມາຍ.

ຖາມ: ຂ້ອຍຈະຕີຄວາມຜົນຂອງ flow cytometry ແນວໃດ?

A: ເພື່ອຕີຄວາມຜົນຂອງ flow cytometry, ສຸມໃສ່ຂໍ້ມູນກະແຈກກະຈາຍແສງສະຫວ່າງ (ໄປຂ້າງຫນ້າແລະກະແຈກກະຈາຍດ້ານຂ້າງ) ແລະຄວາມເຂັ້ມຂອງ fluorescence ເພື່ອກໍານົດປະຊາກອນຈຸລັງໂດຍອີງໃສ່ຂະຫນາດ, ຄວາມສັບສົນ, ແລະການສະແດງອອກຂອງເຄື່ອງຫມາຍ.

Q: ຍຸດທະສາດການ gating ໃນ Flow Cytometry ແມ່ນຫຍັງ?

A: Gating in flow cytometry ແມ່ນຂະບວນການແຍກປະຊາກອນຈຸລັງສະເພາະໂດຍກໍານົດຂອບເຂດໂດຍອີງໃສ່ຄຸນສົມບັດກະແຈກກະຈາຍຫຼື fluorescence, ອະນຸຍາດໃຫ້ມີການວິເຄາະລາຍລະອຽດເພີ່ມເຕີມ.

Q: ເປັນຫຍັງ multicolor flow cytometry ຈຶ່ງເປັນປະໂຫຍດ?

A: Multicolor flow cytometry ອະນຸຍາດໃຫ້ສໍາລັບການວິເຄາະພ້ອມໆກັນຂອງເຄື່ອງຫມາຍຫຼາຍໃນຫນຶ່ງຕົວຢ່າງ, ສະຫນອງຄວາມເຂົ້າໃຈທີ່ສົມບູນແບບຂອງປະຊາກອນຈຸລັງແລະລັກສະນະຂອງພວກມັນ.

Q: Flow Cytometry ສາມາດຊ່ວຍໃນການຄົ້ນຄວ້າມະເຮັງໄດ້ແນວໃດ?

A: Flow cytometry ຊ່ວຍກໍານົດເຄື່ອງຫມາຍເຊນມະເຮັງສະເພາະແລະວິເຄາະລັກສະນະຂອງເນື້ອງອກ, ສະຫນອງຄວາມເຂົ້າໃຈທີ່ມີຄຸນຄ່າສໍາລັບການວິນິດໄສ, ການຄາດຄະເນ, ແລະການຕິດຕາມການປິ່ນປົວ.