របៀបអានលទ្ធផល Cytometry លំហូរ

សេចក្តីផ្តើម

តើអ្នកធ្លាប់ឆ្ងល់ពីរបៀបដែលអ្នកវិទ្យាសាស្ត្រវិភាគកោសិការាប់ពាន់ក្នុងរយៈពេលតែប៉ុន្មានវិនាទី? Flow cytometry គឺជាឧបករណ៍ដ៏មានឥទ្ធិពលដែលធ្វើឱ្យវាអាចធ្វើទៅបាន។ វាអនុញ្ញាតឱ្យអ្នកស្រាវជ្រាវសិក្សាពីលក្ខណៈសម្បត្តិរូបវន្ត និងគីមីនៃកោសិកានីមួយៗយ៉ាងរហ័ស និងត្រឹមត្រូវ។

 

នៅក្នុងអត្ថបទនេះ យើងនឹងស្វែងយល់ពីរបៀបអាន និងបកស្រាយលទ្ធផល flow cytometry។ អ្នកនឹងរៀនពីរបៀបកំណត់សញ្ញាសម្គាល់សំខាន់ៗ វាយតម្លៃស្ថានភាពជំងឺ និងទទួលបានការយល់ដឹងអំពីមុខងារកោសិកា។ ការយល់ដឹងអំពីលទ្ធផលទាំងនេះគឺចាំបាច់សម្រាប់ការសម្រេចចិត្តប្រកបដោយការយល់ដឹងក្នុងការស្រាវជ្រាវវិទ្យាសាស្ត្រ និងការអនុវត្តគ្លីនិក។

 

ការយល់ដឹងអំពីលទ្ធផល Cytometry លំហូរ

មូលដ្ឋានគ្រឹះនៃលំហូរ Cytometry

Flow cytometry ដំណើរការដោយឆ្លងកាត់កោសិកាតាមរយៈកាំរស្មីឡាស៊ែរ ខណៈពេលដែលវាស់ពន្លឺដែលរាយប៉ាយដោយកោសិកានីមួយៗ។ ពន្លឺដែលខ្ចាត់ខ្ចាយផ្តល់ឱ្យអ្នកស្រាវជ្រាវនូវព័ត៌មានសំខាន់ៗអំពីទំហំ និងភាពស្មុគស្មាញខាងក្នុងនៃកោសិកា។ លើសពីនេះទៀត សញ្ញាសម្គាល់ fluorescent ត្រូវបានប្រើដើម្បីដាក់ស្លាកប្រូតេអ៊ីនជាក់លាក់នៅលើ ឬខាងក្នុងកោសិកា ដោយផ្តល់នូវការយល់ដឹងបន្ថែមអំពីលក្ខណៈកោសិកា។

 

Flow cytometers ប្រមូលទិន្នន័យលើការខ្ចាត់ខ្ចាយពន្លឺ និងប៉ារ៉ាម៉ែត្រ fluorescence ។ ទិន្នន័យខ្ចាត់ខ្ចាយពន្លឺត្រូវបានបង្កើតនៅពេលដែលកោសិកាមានអន្តរកម្មជាមួយឡាស៊ែរ ដែលផ្តល់ព័ត៌មានអំពីទំហំ និងរចនាសម្ព័ន្ធខាងក្នុងរបស់វា។ ទិន្នន័យនេះជួយកំណត់ទំហំក្រឡា និងរូបរាង។ ទិន្នន័យ fluorescent ត្រូវបានប្រមូលនៅពេលដែលស្លាក fluorescent ជាក់លាក់ភ្ជាប់ទៅនឹងសមាសធាតុកោសិកាដូចជាប្រូតេអ៊ីន ឬ DNA ដែលបញ្ចេញពន្លឺនៅពេលមានការរំភើប។ សញ្ញាទាំងនេះជួយកំណត់អត្តសញ្ញាណសញ្ញាសម្គាល់កោសិកាជាក់លាក់ ដូចជាប្រូតេអ៊ីនលើផ្ទៃ ឬមាតិកា DNA ដែលមានសារៈសំខាន់សម្រាប់ការយល់ដឹងអំពីឥរិយាបថកោសិកា។

 

ប្រភេទនៃទិន្នន័យនៅក្នុង Flow Cytometry

● បញ្ជូនបន្ត (FSC)៖ វាស់ទំហំក្រឡា។ កោសិកាធំជាងមានទំនោរបង្កើតការខ្ចាត់ខ្ចាយទៅមុខកាន់តែច្រើន ដោយសារពួកវាបង្វែរពន្លឺកាន់តែច្រើន។

● Side scatter (SSC): បង្ហាញពីភាពស្មុគស្មាញកោសិកា ឬរចនាសម្ព័ន្ធខាងក្នុង។ ប៉ារ៉ាម៉ែត្រនេះផ្តល់នូវការយល់ដឹងអំពីភាពក្រឡា និងភាពស្មុគស្មាញនៃក្រឡា ដែលអាចមានប្រយោជន៍សម្រាប់ការបែងចែកប្រភេទកោសិកា ឬរកឃើញភាពមិនប្រក្រតី។

● ប៉ារ៉ាម៉ែត្រនៃពន្លឺ៖ ទាំងនេះវាស់អាំងតង់ស៊ីតេនៃសារធាតុ fluorescence ជាក់លាក់ដែលបញ្ចេញចេញពីអង្គបដិប្រាណ សារធាតុពណ៌ ឬប្រូតេអ៊ីនដែលមានស្លាក។ តាមរយៈការវាស់ស្ទង់ពន្លឺនៃសញ្ញាសម្គាល់ច្រើន ស៊ីតូមេទ្រីលំហូរអាចកំណត់អត្តសញ្ញាណសមាសធាតុកោសិកាជាក់លាក់ ដូចជាអ្នកទទួល DNA ឬប្រូតេអ៊ីន អាស្រ័យលើគោលដៅពិសោធន៍។

 

ប៉ារ៉ាម៉ែត្រ	ការពិពណ៌នា	ការប្រើប្រាស់
បញ្ជូនបន្ត (FSC)	វាស់ទំហំកោសិកា។ កោសិកាធំ ៗ បញ្ចេញពន្លឺកាន់តែច្រើន។	កំណត់ទំហំដែលទាក់ទងនៃកោសិកា។
ការខ្ចាត់ខ្ចាយចំហៀង (SSC)	វាស់ស្ទង់ភាពស្មុគ្រស្មាញខាងក្នុង ឬទំហំក្រឡា។	ជួយវាយតម្លៃភាពស្មុគស្មាញ ឬរចនាសម្ព័ន្ធកោសិកា។
ហ្វ្លុយអូរីស	វិធានការបញ្ចេញពន្លឺចេញពីស្លាកសញ្ញាសម្គាល់។	កំណត់សមាសធាតុកោសិកាជាក់លាក់ដូចជាប្រូតេអ៊ីន ឬ DNA ។

 

តំណាងក្រាហ្វិកសំខាន់ៗនៅក្នុង Flow Cytometry

អ៊ីស្តូក្រាម

អ៊ីស្តូក្រាមគឺជាមធ្យោបាយត្រង់មួយដើម្បីមើលឃើញទិន្នន័យប៉ារ៉ាម៉ែត្រតែមួយនៅក្នុង cytometry លំហូរ។ ពួកវាជាធម្មតាបង្ហាញពីអាំងតង់ស៊ីតេនៃពន្លឺខ្ចាត់ខ្ចាយ ឬ fluorescence នៅលើអ័ក្ស x ខណៈពេលដែលអ័ក្ស y តំណាងឱ្យចំនួនព្រឹត្តិការណ៍ (កោសិកា) ។ ការតំណាងក្រាហ្វិកសាមញ្ញនេះជួយឱ្យយល់យ៉ាងងាយស្រួលនូវការចែកចាយនៃប៉ារ៉ាម៉ែត្រតែមួយនៅទូទាំងចំនួនកោសិកា។

 

នៅក្នុងអ៊ីស្តូក្រាម អ្នកអាចសង្កេតឃើញ៖

● ការផ្លាស់ប្តូរនៅក្នុងកម្រិតកំពូល៖ ការផ្លាស់ប្តូរទៅខាងស្តាំនៃអាំងតង់ស៊ីតេ fluorescence ជាធម្មតាបង្ហាញពីការកើនឡើងនៃកន្សោមនៃសញ្ញាសម្គាល់គោលដៅ។ នេះគឺជាសូចនាករដ៏មានប្រយោជន៍នៃការផ្លាស់ប្តូរនៅក្នុងការបញ្ចេញមតិប្រូតេអ៊ីន ដូចជាក្នុងការឆ្លើយតបទៅនឹងការព្យាបាល។

● ការចែកចាយ Peak៖ ការរីករាលដាលនៃកំពូលផ្តល់នូវការយល់ដឹងអំពីភាពប្រែប្រួលនៅក្នុងកន្សោមសញ្ញាសម្គាល់នៅទូទាំងចំនួនកោសិកា។ កំពូលដ៏ទូលំទូលាយអាចបង្ហាញពីចំនួនប្រជាជនចម្រុះកាន់តែច្រើនជាមួយនឹងកម្រិតនៃការបញ្ចេញមតិខុសៗគ្នា ខណៈដែលកំពូលតូចចង្អៀតបង្ហាញពីឯកសណ្ឋាន។

 

ដីឡូតិ៍ និងចំណុចខ្ចាត់ខ្ចាយ

Dot plots ត្រូវបានគេហៅផងដែរថាជា scatter plots ត្រូវបានគេប្រើជាទូទៅដើម្បីបង្ហាញទិន្នន័យពីរប៉ារ៉ាម៉ែត្រ។ ប្លង់ទាំងនេះអនុញ្ញាតឱ្យអ្នកសង្កេតមើលទំនាក់ទំនងរវាងប៉ារ៉ាម៉ែត្រផ្សេងគ្នាពីរ ដូចជាការខ្ចាត់ខ្ចាយទៅមុខ (FSC) និងផ្នែកចំហៀង (SSC) ឬរវាងសញ្ញាសម្គាល់ហ្វ្លុយអូរីស។ ដោយប្រើចំនុចចំនុច អ្នកអាចវិភាគការជាប់ទាក់ទងគ្នារវាងប៉ារ៉ាម៉ែត្រជាច្រើននៅក្នុងការមើលឃើញតែមួយ។

 

● Gating៖ នៅក្នុងចំនុចចំនុច អ្នកអាចអនុវត្តច្រកទ្វារ (ចតុកោណ រង្វង់ ឬពហុកោណ) ដើម្បីញែកក្រុមរងជាក់លាក់នៃក្រឡាសម្រាប់ការវិភាគបន្ថែម។ Gating អាចឱ្យអ្នកផ្តោតលើចំនួនប្រជាជនដែលបំពេញតាមលក្ខណៈវិនិច្ឆ័យមួយចំនួន ដូចជាទំហំ ភាពលម្អិត ឬកន្សោមសញ្ញាសម្គាល់។

● ការវិភាគពហុប៉ារ៉ាម៉ែត៖ គំនូសចំនុចជួយឱ្យមើលឃើញពីទំនាក់ទំនងរវាងអថេរពីរ ឬច្រើន ដែលអនុញ្ញាតឱ្យអ្នកបែងចែករវាងចំនួនកោសិកាផ្សេងៗគ្នាដោយផ្អែកលើលក្ខណៈវិនិច្ឆ័យជាច្រើន ដូចជាសញ្ញាសម្គាល់ ឬលក្ខណៈខ្ចាត់ខ្ចាយ។ នេះមានប្រយោជន៍ជាពិសេសនៅពេលដោះស្រាយជាមួយចំនួនកោសិកាដែលស្មុគស្មាញ ឬច្រើនប្រភេទ។

 

យុទ្ធសាស្ត្រកំណត់អត្តសញ្ញាណកោសិកា

បច្ចេកទេសច្រកទ្វារ	ការពិពណ៌នា	ប្រើករណី
ច្រកទ្វារបួនជ្រុង	ចែកគ្រោងជាបួនជ្រុង។	មានប្រយោជន៍សម្រាប់ការវិភាគប៉ារ៉ាម៉ែត្រពីរ (ឧទាហរណ៍ FSC និង SSC) ។
ពហុកោណ Gating	បង្កើតទម្រង់ផ្ទាល់ខ្លួន ដើម្បីរួមបញ្ចូលចំណុចទិន្នន័យចម្រុះបន្ថែមទៀត។	ល្អបំផុតសម្រាប់ចំនួនប្រជាជនដែលស្មុគស្មាញ ឬរាងមិនទៀងទាត់។
ច្រកទ្វាររាងពងក្រពើ	ស្រដៀង​នឹង​ការ៉េ ប៉ុន្តែ​បង្កើត​តំបន់​រាង​អេលីប។	មានប្រសិទ្ធភាពសម្រាប់ប្រជាជនដែលមិនមានកណ្តាល។

 

ការណែនាំអំពី Gating

Gating គឺជាបច្ចេកទេសដ៏សំខាន់មួយនៅក្នុង flow cytometry ដែលអនុញ្ញាតឱ្យអ្នកកំណត់អត្តសញ្ញាណ និងញែកចំនួនកោសិកាជាក់លាក់ពីគំរូធំជាង។ ដោយអនុវត្តច្រកទ្វារទៅកាន់ទិន្នន័យ cytometry លំហូររបស់អ្នក អ្នកអាចផ្តោតលើក្រឡាដែលបង្ហាញលក្ខណៈជាក់លាក់ ដូចជាទំហំ ភាពស្មុគស្មាញ ឬកន្សោមសញ្ញាសម្គាល់។

 

ដំណើរការច្រកចេញជាធម្មតាពាក់ព័ន្ធនឹង៖

● ការជ្រើសរើសចំនួនប្រជាជន៖ Gates ជួយអ្នកឱ្យញែកកោសិការងជាក់លាក់មួយ ដោយផ្អែកលើលក្ខណៈដែលគេស្គាល់។ ឧទាហរណ៍ អ្នក​អាច​ច្រក​លើ​ក្រឡា​ដែល​វិជ្ជមាន​សម្រាប់​សញ្ញាសម្គាល់​ជាក់លាក់​មួយ (ឧ. CD3 សម្រាប់​កោសិកា T) ឬ​នៅលើ​ក្រឡា​ដែល​មាន​លក្ខណៈ​សម្បត្តិ​ខ្ចាត់ខ្ចាយ​ជាក់លាក់។

● ការមិនរាប់បញ្ចូលចំនួនប្រជាជនដែលមិនចង់បាន៖ Gates ក៏ជួយអ្នកក្នុងការដកចេញនូវភាគល្អិតដែលមិនចង់បាន ដូចជាកោសិកាងាប់ ឬកំទេចកំទីដែលអាចបង្ខូចការវិភាគរបស់អ្នក។ នេះធានាថាទិន្នន័យដែលអ្នកវិភាគគឺត្រឹមត្រូវ និងពាក់ព័ន្ធទៅនឹងការស្រាវជ្រាវរបស់អ្នក។

 

របៀបប្រើ Gating ដើម្បីត្រងចំនួនប្រជាជន

ដើម្បីបកស្រាយទិន្នន័យ cytometry លំហូរប្រកបដោយប្រសិទ្ធភាព វាចាំបាច់ក្នុងការកំណត់ច្រកសមស្របដែលផ្តោតលើចំនួនប្រជាជនដែលចាប់អារម្មណ៍។ ឧទាហរណ៍៖

● ការមិនរាប់បញ្ចូលកោសិកាដែលស្លាប់៖ កោសិកាដែលស្លាប់ជាញឹកញាប់បង្ហាញនូវលក្ខណៈសម្បត្តិបែកខ្ចាត់ខ្ចាយតែមួយគត់ ដែលអាចត្រូវបានប្រើដើម្បីសម្គាល់ពួកវាពីកោសិកាដែលអាចដំណើរការបាន។ តាមរយៈការចូលទៅកាន់ផ្នែកទៅមុខ (FSC) និងផ្នែកខាងខ្ចាត់ខ្ចាយ (SSC) អ្នកអាចមិនរាប់បញ្ចូលកោសិកាដែលងាប់ ឬ apoptotic ដែលអាចបំភាន់ទិន្នន័យរបស់អ្នក។

● ការញែកចំនួនប្រជាជនជាក់លាក់៖ Gating អនុញ្ញាតឱ្យអ្នកជ្រើសរើស និងវិភាគក្រុមរងជាក់លាក់នៃកោសិកាដោយផ្អែកលើសញ្ញាសម្គាល់ ឬលក្ខណៈរូបវន្ត។ ឧទាហរណ៍ អ្នកអាចចូលទៅកាន់កោសិកា T ដោយកំណត់គោលដៅប្រូតេអ៊ីនលើផ្ទៃជាក់លាក់មួយ (ឧទាហរណ៍ CD3) ហើយបន្ទាប់មកវិភាគការបញ្ចេញមតិរបស់ពួកគេនៃសញ្ញាសម្គាល់ផ្សេងទៀត (ឧទាហរណ៍ កម្រិត cytokine)។

 

ការវិភាគ Cytometry កម្រិតខ្ពស់

ស៊ីតូមេទ្រីលំហូរពហុពណ៌

Multicolor flow cytometry គឺជាបច្ចេកទេសកម្រិតខ្ពស់ដែលពាក់ព័ន្ធនឹងការប្រើសញ្ញាសម្គាល់ fluorescent ច្រើនដើម្បីវិភាគក្នុងពេលដំណាលគ្នានូវសញ្ញាសម្គាល់កោសិកាផ្សេងៗគ្នាក្នុងគំរូមួយ។ វិធីសាស្រ្តនេះពង្រឹងសមត្ថភាពយ៉ាងសំខាន់ក្នុងការបែងចែករវាងប្រភេទកោសិកា និងប្រភេទរងនៅក្នុងល្បាយស្មុគស្មាញនៃកោសិកា។

 

● គុណសម្បត្តិ៖ អត្ថប្រយោជន៍ចម្បងនៃ cytometry លំហូរពហុពណ៌គឺថាវាអនុញ្ញាតឱ្យមានការវិភាគនៃប៉ារ៉ាម៉ែត្រជាច្រើនក្នុងពេលតែមួយ ដែលធ្វើអោយការពិសោធន៍កាន់តែមានប្រសិទ្ធភាព។ វាមានប្រយោជន៍ជាពិសេសនៅពេលដែលអ្នកត្រូវពិនិត្យមើលសញ្ញាសម្គាល់ជាច្រើននៅលើចំនួនកោសិកាតែមួយ។

● ការបកស្រាយលទ្ធផលពហុពណ៌៖ សញ្ញាសម្គាល់នីមួយៗនៅក្នុង cytometry លំហូរពហុពណ៌ត្រូវបានរំភើបដោយរលកពន្លឺជាក់លាក់ ដែលអនុញ្ញាតឱ្យមានភាពខុសគ្នាយ៉ាងជាក់លាក់រវាងប្រភេទកោសិកា ឬស្ថានភាពផ្សេងៗ។ នេះមានប្រយោជន៍ជាពិសេសក្នុងការបង្កើតកោសិកាភាពស៊ាំ ការស្រាវជ្រាវមហារីក និងផ្នែកផ្សេងទៀតដែលសញ្ញាសម្គាល់ច្រើនត្រូវការវិភាគក្នុងពេលដំណាលគ្នា។

 

ប្រភេទសញ្ញាសម្គាល់	fluorochrome ត្រូវបានប្រើ	កម្មវិធីទូទៅ
CD3 (កោសិកា T)	FITC, PE, APC	កំណត់អត្តសញ្ញាណ T lymphocytes នៅក្នុងទម្រង់នៃប្រព័ន្ធភាពស៊ាំ។
CD4 (ជំនួយ T កោសិកា)	PerCP-Cy5.5, APC	កំណត់កោសិកា T ជំនួយសម្រាប់មុខងារប្រព័ន្ធភាពស៊ាំ។
CD8 (កោសិកា Cytotoxic T)	PE, APC, BV421	ការកំណត់កោសិកា T cytotoxic ក្នុងការឆ្លើយតបនៃប្រព័ន្ធភាពស៊ាំ។
CD19 (កោសិកា B)	FITC, PE, PerCP	ការបង្កើតកោសិកា B នៅក្នុងការសិក្សាអំពីភាពស៊ាំ និងជំងឺមហារីកឈាម។

 

អ្នក ច្រៀង PCA, SPADE និង tSNE សម្រាប់ទិន្នន័យស្មុគស្មាញ

ទិន្នន័យ cytometry លំហូរ ជារឿយៗពាក់ព័ន្ធនឹងប៉ារ៉ាម៉ែត្រជាច្រើន ដែលអាចបណ្តាលឱ្យមានសំណុំទិន្នន័យដែលមានវិមាត្រខ្ពស់។ ដើម្បីវិភាគសំណុំទិន្នន័យស្មុគស្មាញទាំងនេះប្រកបដោយប្រសិទ្ធភាព អ្នកស្រាវជ្រាវប្រើបច្ចេកទេសវិភាគទិន្នន័យកម្រិតខ្ពស់៖

● ការវិភាគសមាសធាតុចម្បង (PCA)៖ PCA គឺជាវិធីសាស្ត្រស្ថិតិដែលប្រើដើម្បីកាត់បន្ថយវិមាត្រនៃសំណុំទិន្នន័យធំ ខណៈពេលដែលរក្សាព័ត៌មានឱ្យបានច្រើនតាមដែលអាចធ្វើទៅបាន។ វាជួយកំណត់អត្តសញ្ញាណគំរូ និងទំនាក់ទំនងរវាងអថេរច្រើន ដែលធ្វើឱ្យវាកាន់តែងាយស្រួលក្នុងការមើលឃើញទិន្នន័យស្មុគស្មាញ។

● SPADE (ការវិភាគការរីកដុះដាលនៃមែកធាងនៃព្រឹត្តិការណ៍ដែលមានលក្ខណៈធម្មតានៃដង់ស៊ីតេ): SPADE គឺជាបច្ចេកទេសដែលត្រូវបានប្រើដើម្បីវិភាគសំណុំទិន្នន័យធំដោយផ្តោតលើចំនួនកោសិការងនៅក្នុងចំនួនប្រជាជនចម្រុះ។ វិធីសាស្រ្តនេះអនុញ្ញាតឱ្យអ្នកស្រាវជ្រាវសិក្សាពីសក្ដានុពលនៃចំនួនកោសិកាតាមពេលវេលា ឬឆ្លើយតបទៅនឹងការព្យាបាល។

● tSNE (t-Distributed Stochastic Neighbor Embedding): tSNE គឺជាក្បួនដោះស្រាយមួយដែលប្រើដើម្បីកាត់បន្ថយវិមាត្រនៃទិន្នន័យ ដែលធ្វើឱ្យវាកាន់តែងាយស្រួលក្នុងការស្រមៃមើលទំនាក់ទំនងរវាងកោសិកាក្នុងចន្លោះវិមាត្រខ្ពស់។ នេះមានប្រយោជន៍ជាពិសេសសម្រាប់ការចង្កោមកោសិកាដែលមានលក្ខណៈស្រដៀងគ្នា។

 

បច្ចេកទេសកម្រិតខ្ពស់ទាំងនេះអាចឱ្យអ្នកស្រាវជ្រាវទាញយកការយល់ដឹងដ៏មានអត្ថន័យពីទិន្នន័យ cytometry លំហូរស្មុគស្មាញ និងជួយសម្រួលដល់ការបកស្រាយនៃសំណុំទិន្នន័យធំ។

 

ការបកស្រាយលទ្ធផល

ការកំណត់អត្តសញ្ញាណសុខភាពធៀបនឹងកោសិកាមិនប្រក្រតី

Flow cytometry ត្រូវបានគេប្រើយ៉ាងទូលំទូលាយនៅក្នុងការកំណត់គ្លីនិកដើម្បីរកឱ្យឃើញពីភាពមិនធម្មតានៃកោសិកា ដូចជាក្នុងការវិភាគរោគមហារីកជាដើម។ ដោយការប្រៀបធៀបគំរូនៃហ្វ្លុយអូរីស និងខ្ចាត់ខ្ចាយ អ្នកអាចបែងចែករវាងកោសិកាដែលមានសុខភាពល្អ និងកោសិកាដែលបង្ហាញលក្ខណៈមិនប្រក្រតី។

 

ឧទាហរណ៍៖

● ការរកឃើញមហារីក៖ នៅក្នុងជំងឺមហារីកវិទ្យា ការវិភាគស៊ីតូមេទ្រីលំហូរត្រូវបានគេប្រើជាទូទៅដើម្បីកំណត់អត្តសញ្ញាណកោសិកាមហារីកដោយស្វែងរកសញ្ញាសម្គាល់លើផ្ទៃជាក់លាក់ ឬការផ្លាស់ប្តូរនៅក្នុងខ្លឹមសារ DNA ដែលមានលក្ខណៈធម្មតានៃកោសិកាមហារីក។

● ការបង្កើតកោសិកាភាពស៊ាំ៖ ស៊ីតូមេទ្រីលំហូរក៏អាចត្រូវបានប្រើដើម្បីវិភាគកោសិកាភាពស៊ាំ កំណត់អត្តសញ្ញាណកោសិកា T ដែលបានធ្វើឱ្យសកម្ម ការចងចាំ ឬនិយតកម្មនៅក្នុងការឆ្លើយតបនៃប្រព័ន្ធភាពស៊ាំ ដែលជួយតាមដានមុខងារប្រព័ន្ធភាពស៊ាំ ឬការវិវត្តនៃជំងឺ។

 

ការយល់ដឹងពីការគ្រប់គ្រងវិជ្ជមាន និងអវិជ្ជមាន

ដើម្បីធានាបាននូវសុពលភាពនៃលទ្ធផលរបស់អ្នក វាចាំបាច់ក្នុងការរួមបញ្ចូលការត្រួតពិនិត្យវិជ្ជមាន និងអវិជ្ជមានត្រឹមត្រូវក្នុងការពិសោធន៍របស់អ្នក៖

● ការត្រួតពិនិត្យជាវិជ្ជមាន៖ ជាគំរូដែលគួរបង្ហាញកន្សោមសញ្ញាសម្គាល់ជាក់លាក់ ដោយធានាថា ការវិភាគដំណើរការដូចការរំពឹងទុក។

● ការគ្រប់គ្រងអវិជ្ជមាន៖ ជាគំរូដែលមិនគួរបង្ហាញកន្សោមសញ្ញាសម្គាល់ ដែលជួយរកមើលពន្លឺផ្ទៃខាងក្រោយ ឬការចងមិនជាក់លាក់។

 

ការត្រួតពិនិត្យមានសារៈសំខាន់ណាស់សម្រាប់ផ្ទៀងផ្ទាត់ភាពត្រឹមត្រូវនៃទិន្នន័យរបស់អ្នក និងធានាថាលទ្ធផលដែលបានសង្កេតឃើញពិតជាឆ្លុះបញ្ចាំងពីបាតុភូតជីវសាស្ត្រដែលអ្នកកំពុងសិក្សា។

 

គន្លឹះជាក់ស្តែងសម្រាប់ការបកស្រាយទិន្នន័យលំហូរ Cytometry

រួមបញ្ចូលការត្រួតពិនិត្យត្រឹមត្រូវ។

ការរួមបញ្ចូលការត្រួតពិនិត្យនៅក្នុងការពិសោធន៍ cytometry លំហូររបស់អ្នកគឺចាំបាច់សម្រាប់ការទទួលបានទិន្នន័យត្រឹមត្រូវ។ ការគ្រប់គ្រងជួយដល់៖

● ធ្វើ​ឱ្យ​មាន​សុពលភាព​នៃ​ប្រសិទ្ធ​ភាព​នៃ​សញ្ញា​សម្គាល់ fluorescent ដែល​បាន​ប្រើ។

● ត្រូវប្រាកដថា ហ្វ្លុយអូរីសដែលបានសង្កេតគឺជាក់លាក់ចំពោះកោសិកាគោលដៅ និងមិនមែនដោយសារវត្ថុបុរាណពិសោធន៍ ឬការចងមិនជាក់លាក់នោះទេ។

 

ស្វែងយល់ពីការរចនាពិសោធន៍

ការពិសោធន៍ដែលបានរចនាឡើងយ៉ាងល្អមានសារៈសំខាន់ណាស់ក្នុងការធានាថាទិន្នន័យដែលអ្នកប្រមូលមានអត្ថន័យ និងអាចផលិតឡើងវិញបាន។ ពិចារណាចំណុចខាងក្រោមនៅពេលរចនាការពិសោធន៍របស់អ្នក៖

● ការរៀបចំគំរូ៖ ការចាត់ចែងគំរូត្រឹមត្រូវគឺចាំបាច់ដើម្បីកាត់បន្ថយភាពប្រែប្រួល។ ជាឧទាហរណ៍ ការធានាថាកោសិការបស់អ្នកស្ថិតនៅក្នុងការផ្អាកកោសិកាតែមួយគឺមានសារៈសំខាន់សម្រាប់ការវិភាគត្រឹមត្រូវ។

● ការរចនាបន្ទះ៖ ជម្រើសនៃសញ្ញាសម្គាល់ និង fluorochromes គួរតែផ្អែកលើគោលដៅនៃការពិសោធន៍។ ឧទាហរណ៍ ប្រសិនបើអ្នកចាប់អារម្មណ៍ក្នុងការវិភាគចំនួនកោសិកាភាពស៊ាំ សូមជ្រើសរើសសញ្ញាសម្គាល់ដែលកំណត់អត្តសញ្ញាណជាក់លាក់នៃកោសិការង T ផ្សេងៗគ្នា។

 

សេចក្តីសន្និដ្ឋាន

ការអាន និងការបកស្រាយលទ្ធផល cytometry លំហូរទាមទារការយល់ដឹងច្បាស់លាស់អំពីបច្ចេកវិទ្យា វិធីសាស្រ្ត និងបរិបទជីវសាស្ត្រ។ តាមរយៈការស្ទាត់ជំនាញមូលដ្ឋាន cytometry លំហូរ ការវិភាគទិន្នន័យកម្រិតខ្ពស់ និងការរចនាពិសោធន៍ត្រឹមត្រូវ អ្នកអាចទទួលបានការយល់ដឹងដ៏មានតម្លៃដែលជំរុញការរកឃើញតាមបែបវិទ្យាសាស្ត្រ និងជូនដំណឹងដល់ការសម្រេចចិត្តព្យាបាល។ មិនថាធ្វើការនៅក្នុងការស្រាវជ្រាវជំងឺមហារីក ភាពស៊ាំ ឬរោគវិនិច្ឆ័យទេ ការបកស្រាយទិន្នន័យ cytometry លំហូរគឺចាំបាច់សម្រាប់ការសម្រេចចិត្តដែលមានព័ត៌មានដែលនាំទៅរកការព្យាបាលប្រសើរជាងមុន និងធ្វើឱ្យលទ្ធផលអ្នកជំងឺប្រសើរឡើង។ សម្រាប់អ្នកដែលកំពុងស្វែងរកដើម្បីបង្កើនការស្រាវជ្រាវ ឬការវិភាគគ្លីនិករបស់ពួកគេ ផលិតផលពី HKeybio ផ្តល់ជូននូវដំណោះស្រាយតែមួយគត់ដើម្បីជំរុញកម្មវិធី cytometry លំហូរ ដោយផ្តល់នូវឧបករណ៍ដ៏មានតម្លៃសម្រាប់ការបកស្រាយទិន្នន័យច្បាស់លាស់ និងការវិភាគកោសិកា។

 

សំណួរគេសួរញឹកញាប់

សំណួរ៖ តើ Flow Cytometry ជាអ្វី?

A: Flow cytometry គឺជាបច្ចេកទេសមួយដែលប្រើដើម្បីវិភាគលក្ខណៈរូបវន្ត និងគីមីនៃកោសិកា ឬភាគល្អិតដោយឆ្លងកាត់ពួកវាតាមរយៈកាំរស្មីឡាស៊ែរ។ វាវាស់ការខ្ចាត់ខ្ចាយពន្លឺ និងហ្វ្លុយអូរីស ដើម្បីប្រមូលទិន្នន័យអំពីទំហំ ភាពស្មុគស្មាញ និងសញ្ញាសម្គាល់។

សំណួរ៖ តើខ្ញុំបកស្រាយលទ្ធផល ស៊ីតូមេទ្រីលំហូរយ៉ាងដូចម្តេច?

ចម្លើយ៖ ដើម្បីបកស្រាយលទ្ធផល cytometry លំហូរ ផ្តោតលើទិន្នន័យខ្ចាត់ខ្ចាយពន្លឺ (ទៅមុខ និងចំហៀង) និងអាំងតង់ស៊ីតេ fluorescence ដើម្បីកំណត់ចំនួនកោសិកាដោយផ្អែកលើទំហំ ភាពស្មុគស្មាញ និងកន្សោមសញ្ញាសម្គាល់។

សំណួរ៖ តើអ្វីជាយុទ្ធសាស្ត្រច្រកចេញចូលក្នុង Flow Cytometry?

A: Gating in flow cytometry គឺជាដំណើរការនៃការញែកចំនួនកោសិកាជាក់លាក់ដោយកំណត់ព្រំដែនដោយផ្អែកលើលក្ខណៈសម្បត្តិដែលខ្ចាត់ខ្ចាយ ឬ fluorescence ដែលអនុញ្ញាតឱ្យមានការវិភាគលម្អិតបន្ថែមទៀត។

សំណួរ: ហេតុអ្វីបានជា cytometry លំហូរពហុពណ៌មានប្រយោជន៍?

A: Multicolor flow cytometry អនុញ្ញាតឱ្យមានការវិភាគក្នុងពេលដំណាលគ្នានៃសញ្ញាសម្គាល់ច្រើននៅក្នុងគំរូមួយ ដោយផ្តល់នូវការយល់ដឹងកាន់តែទូលំទូលាយអំពីចំនួនកោសិកា និងលក្ខណៈរបស់វា។

Q: តើ Flow Cytometry អាចជួយក្នុងការស្រាវជ្រាវមហារីកយ៉ាងដូចម្តេច?

A: Flow cytometry ជួយកំណត់អត្តសញ្ញាណសញ្ញាសម្គាល់កោសិកាមហារីកជាក់លាក់ និងវិភាគលក្ខណៈនៃដុំសាច់ ដោយផ្តល់នូវការយល់ដឹងដ៏មានតម្លៃសម្រាប់ការធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យ ការព្យាករណ៍ និងការត្រួតពិនិត្យការព្យាបាល។