Whakatuwheratanga
Kua maarama tonu koe me pehea te tātari o nga kairangahau mano i roto i te hēkona noa? Ko te taatai rere te taputapu kaha e taea ai tenei. Ka taea e nga kairangahau ki te ako i nga ahuatanga o te tinana me te matū o nga pūtau takitahi me te tika.
I roto i tenei tuhinga, ka tirotirohia e matou me pehea te panui me te whakamaori i nga hua cytometry rere. Ka ako koe me pehea te tautuhi i nga tohu whakahirahira, ka aromatawaihia nga mate mate, ka whai matauranga ki te taumahinga pūkoro. Ko te maarama ki enei hua he mea nui kia whakatauhia nga whakataunga i roto i te rangahau pūtaiao me te mahi haumanu.
Te maarama i nga Huarahi Tere Rorohiko
Nga Paanga o te Huringa Tere
Ka mahi nga huringa rere ma te tuku i nga pūtau ma te kurupae laser i te wa e ine ana i te maama e te marara. Ko te maama marara e hoatu ki nga kairangahau nui nga korero mo te rahi me te uaua o roto o te pūtau. I tua atu, ka whakamahia nga tohu mo nga tohu hei tohu i nga pūmua motuhake i roto, i roto ranei i nga punaha, te whakarato maarama ki nga ahuatanga o te aorangi.
Ko nga huringa rere e kohikohi ana i nga raraunga i runga i te marara rama me nga tohu taapiri. Ko nga raraunga marara marama ka hangaia i te taunekeneke ki te laser, e whakaatu ana i nga korero mo to raatau rahi me te hanganga o roto. Ka awhina tenei raraunga ki te whakatau i te karaera me te ahua o te pūtau. Ka kohia nga raraunga a te Flowutsce i te wa e herea ana nga tohu taapiri ki nga waahanga pūkoro penei i te pūmua, i te DNA ranei, e whakaatu ana i te maama ki runga i te whakaihiihi. Ko enei tohu e awhina ana i te tautuhi i nga tohu pūtau motuhake, penei i nga pūmua mata, i nga tuhinga DNA ranei, he mea nui mo te whanonga pūtau.
Nga momo raraunga i roto i te huringa rere
● Whakapaihia te marara (FSC): Te ine i te rahi o te pūtau. Ko nga punaha nui ake ka kaha ake te whakaputa whakamua na te mea ka kaha ake te maarama.
● Kua marara te taha (SSC): e whakaatu ana i te uaua o te pūtau, te hanganga o roto ranei. Ko tenei tohu e whakaatu ana i te matauranga ki te marau me te uaua o te pūtau, ka taea te whai hua mo nga momo pūtau, ki te rapu kino ranei.
● Ko nga tohu taapiri: Ko enei te tikanga o te kaha o te maamaa e puta mai ana i nga rongoā antibodies, waikano, me te pūmua ranei. Ma te ine i te kiko o nga tohu maha, ka taea e te taatai te tautuhi i nga waahanga pūkoro motuhake, penei i nga kaitohu, i te papa, i runga i nga whaainga whakamatautau.
Parapara |
Whakaaturanga |
Whakamahi |
Tuhinga o mua (FSC) |
Te ine i te rahi o te pūtau. Ko nga punaha nui ka nui ake te marama. |
Whakatau i te rahi whanaunga o nga pūtau. |
Taha maui (ssc) |
Te ine i te uaua o roto, te koretake ranei o te pūtau. |
Ka awhina i te matatini pūtau, te hanganga ranei. |
Mataora |
Ko nga mehua i tukuna mai i nga tohu kua tohua. |
Ka tautuhi i nga waahanga pūtau motuhake penei i te pūmua, i te DNA ranei. |
Ko nga whakaaturanga whakairoiro matua i roto i te huringa rere
Huringa
Ko te hinonga he huarahi tika hei whakaatu i nga raraunga taapiri-kotahi i roto i te huringa rere. I te nuinga o te waa ka whakaatu ratou i te kaha o te rama, i te waatea ranei i runga i te X-tuaka, i te wa e tohu ana te Y-tuaka ki te maha o nga huihuinga. Ko tenei whakaaturanga whakairoiro ngawari e awhina ana i te maarama ki te tohatoha o te taatai kotahi puta noa i te taupori o nga pūtau.
I roto i nga tohutoro, ka taea e koe te kite:
● Whakawhiti i roto i nga tihi: Ko te nekehanga ki te taha matau o te kaha e whakaatu ana i te kaha o te whakaaturanga o te tohu whaainga. He tohu awhina tenei mo nga huringa i te whakaaturanga pūmua, penei i te whakautu ki te maimoatanga.
● Te tohatoha Peak: Ko te horapa o te tihi ka whai kiko ki te rereketanga o te whakaaturanga o te tohu puta noa i te taupori. Ko te tihi whanui e whakaatu ana i tetahi atu taangata nui me nga taumata o te kohinga rereke, ahakoa he tihi kuiti e tohu ana i te riterite.
Ko nga papa whenua me nga papa e toro ana
Ko nga papa whenua, i kiia hoki ko te mea ka marara, ka whakamahia noa hei whakaatu i nga raraunga e rua. Ko enei whakaaro ka taea e koe te mohio ki nga hononga i waenga i nga tohu motuhake e rua, penei i te marara o mua (FSC) me nga tohu tohu. Ma te whakamahi i nga papaa Dot, ka taea e koe te tātari i te whakatikatika i waenga i nga tohu maha i roto i te whakaaro kotahi.
● Te Taha: I roto i nga papa whenua, ka taea e koe te tono i nga kuaha (tapawha, porowhita, polygons ranei) kia wehea nga waahanga motuhake o nga pūtau mo te tātari ake. Ka taea e te maakete te aro ki nga taupori e tutuki ana i etahi paearu, penei i te rahi, te karaati, te tohu tohu ranei.
● Te tātaritanga Microsamerrameter: Ko nga papaaro te awhina i te whanaungatanga i waenga i nga taurangi e rua, neke atu ranei ki te wehe i nga paearu pūtau. He tino whai hua tenei i te wa e pa ana ki te taupori matatini, he heterogeneous ranei.
Nga rautaki tarai hei tautuhi i nga taupori pūtau
Tikanga tuku |
Whakaaturanga |
Whakamahia te keehi |
Tihi quadrant |
Ka wehe i te mahere kia wha nga quadrants. |
Whai hua mo te tātari e rua nga taapiri (hei tauira, FSC vs SSC). |
Polygon tiihi |
Ka hangaia he ahua ritenga hei whakauru i nga tohu raraunga rereke. |
He pai mo nga taupori nui ake ranei o te taupori. |
Ellipse Barting |
Rite ki te quadrant engari ka hangaia he rohe elliptical. |
Whai hua mo nga taupori kaore i te aro. |
He kupu whakataki hei tarai
Ko te riipene he tikanga nui ki te huringa rere e taea ai e koe te tautuhi me te wehe i nga taupori pūtau mai i te tauira nui ake. Ma te tono tatau ki o raraunga taapiri rere, ka taea e koe te arotahi ki nga pūtau e whakaatu ana i etahi ahuatanga, penei i te rahi, te uaua, te tohu tohu ranei.
Ko te mahi whiu te nuinga o te:
● Te kowhiri i te taupori: Ka awhina nga tatau ki a koe te wehe i tetahi waahanga motuhake o nga pūtau e pa ana ki nga ahuatanga e mohiotia ana. Hei tauira, ka taea e koe te tatau i runga i nga pūtau e pai ana mo tetahi tohu tohu (hei tauira, CD3 mo nga pūtau) i runga i nga pūtau ranei me nga waahanga marara.
● Te wehe i nga taupori e hiahiatia ana: Ka awhina ano hoki nga tatau ki a koe kia aukati i nga matūriki e hiahiatia ana, penei i nga pūtau mate, i te otaota ranei, ka taea e koe te tarai i to tātaritanga. Ma tenei ka whakarite ko nga raraunga e tātarihia ana he tika me te whai take ki o rangahau.
Me pehea te whakamahi i nga Taonga ki te Tātari
Hei whakamaori i nga raraunga taapiri rere tere, he mea nui kia whakatakotoria nga tatau e tika ana kia aro ki te taupori o te paanga. Hei tauira:
● Te wehe i nga pūtau mate: He maha nga wa e whakaatuhia ana e nga pūtau mate, ka taea te whakamahi ki te wehe i a raatau mai i nga pūtau pai. Ma te haehae i te marara whakamua (FSC) me te taha marara (SSC), ka taea e koe te aukati i nga punaha mate, i te apoptotic ranei ka rite ki o raraunga.
● Nga mahi whakahiato i nga taupori motuhake: Ka taea e koe te kowhiri me te tātari i nga waahanga motuhake o nga pūtau e pa ana ki nga tohu, i nga ahuatanga tinana ranei. Hei tauira, ka taea e koe te tatau i runga i nga pūtau t ma te whakauru i tetahi pūmua mata (hei tauira, CD3) ka tarai i to raatau korero mo tetahi atu tohu (hei tauira, nga taumata cytokine).
Tātaritanga Huringa Tere Tere
Huarahi Ruarua Multicolor
Ko te huringa o te huringa rererau he tikanga matatau e uru ana ki te whakamahi i nga tohu maamaa maha ki te tātari i nga tohu rereke rereke i roto i tetahi tauira. Ko tenei tikanga ka whakarei ake i te kaha ki te rereke i waenga i nga momo pūtau me nga tohu i roto i te ranunga matatini o nga pūtau.
● Painga: Ko te painga o te hangarau o te maha o te papamahi ko te mea e taea ai te tātari o nga tohu maha i te wa kotahi, ka whai hua tonu. He tino whai hua tenei ki te hiahia koe ki te tirotiro i nga tohu maha i runga i te taupori o te pūtau kotahi.
● Whakamāramahia nga hua maha: Ko ia tohu i roto i te huringa rere maha o te maarama, e tuku ana mo te rereketanga o nga momo pūtau, ki nga whenua ranei. He tino awhina tenei i roto i te tarukino, te rangahau i te mate pukupuku, me etahi atu waahanga e tika ana kia tātarihia nga tohu maha.
Momo tohu |
Whakamahia ai te fluorochrome |
Tono noa |
CD3 (t pūtau) |
FORC, PE, APC |
Te tautuhi i te lymphocytes i roto i te aukati. |
CD4 (Helper T pūtau) |
Percp-Cy5.5, APC |
Te tautuhi i nga Kaihauturu Kaitono mo te Mahi Hauora. |
CD8 (Cytotoxic T pūtau) |
PE, APC, BV421 |
Te tautuhi i nga pūtau cytotoxic i roto i te aukati i nga urupare. |
Cd19 (b c pūkaha) |
Fitc, pe, Percp |
Ko nga pūtau b i roto i nga mahi kano me nga rangahau a Leukemia. |
Ka waiata koe i te PCA, te kaheru, me te Tsne mo nga raraunga matatini
Ko nga raraunga taapiri rere ka uru pinepine he tohu maha, ka taea e te hua o te papa teitei. Hei tātari i enei takahanga matatini, e mahi ana nga kairangahau i nga tikanga tātari raraunga matatau:
● Ko te Tātai Tiwhikete Tumuaki (PCA): Ko te PCA he tikanga tatauranga e whakamahia ana hei whakaiti i te ahua o nga taapapa nui i te wa e mau tonu ai nga korero. Ka awhina ia ki te tautuhi i nga tauira me nga hononga i waenga i nga taurangi maha, kia ngawari ake ai te tiro i nga raraunga matatini.
● Kaweheahia (Te tātaritanga ahunga whakamua - te ahunga whakamua o nga kaupapa-a-ringa): Ko te Spade he tikanga e whakamahia ana hei tātari i nga paparahi nui ma te aro ki nga waahanga kino o roto i te taupori heterogenees. Ko tenei tikanga ka taea e nga kairangahau te ako i nga hihiri o te taupori o nga pūtau mo te waa, i te whakautu ranei ki te maimoatanga.
● Tsne (Tsne (TSNE COOCHISCISTED TE WHAKAMAHI): Ko TsNE he algorithm i whakamahia hei whakaiti i te ahua o te raraunga, kia pai ake ai te whakaatu i nga hononga i waenga i nga pūtau i te waahi tiketike. He tino whai hua tenei mo nga pūtau tautau me nga ahuatanga rite.
Ko enei tikanga matatau ka taea ai e nga kairangahau ki te tango i nga mohiotanga e whai kiko ana mai i nga waahanga taapiri o te ra uaua me te whakamaarama i te whakamaoritanga o nga papaa nui.
Te whakamaori i nga hua
Te tautuhi i nga momo hauora vs.
E whakamahia whānuitia ana te huringa rere i roto i nga tautuhinga haumanu kia kitea ai nga koretake i roto i nga pūtau, penei i te mate pukupuku mate pukupuku. Ma te whakataurite i nga tauira taapiri, ka taea e koe te rereke i waenga i nga pūtau hauora me era e whakaatu ana i nga ahuatanga kore.
Hei tauira:
● Te kitenga o te mate pukupuku: i roto i te riri, ka whakamahia te huringa rere hei whakaatu i nga tohu mate pukupuku ma te rapu i nga tohu mata e pa ana ki nga ihirangi DNA.
● Ka taea e te huringa o te tipu te whakamahi i nga punaha whakangungu, te tautuhi i nga pūtau wawao i roto i nga urupare, hei awhina i te mahi mo te aukati i te mate uruta ranei.
Te māramatanga ki ngā mana whakahaere me te kino
Hei whakarite i te mana o o hua, he mea nui kia whakauruhia nga mana pai me te kino ki o whakamatautau:
● Te mana whakahaere: he tauira hei whakaatu i tetahi whakaaturanga tohu motuhake, me te whakarite kia mahi te taua ki te mahi.
● Te mana kino: he tauira e kore e whakaatu i te whakaaturanga tohu, hei awhina i te whakaatu i te huringa papamuri, i te riihi ranei o te konspecific.
He mea nui nga mana whakahaere mo te whakaū i te tika o o raraunga me te whakarite ko nga hua o te tuuturu e whakaatu ana i nga ahuatanga koiora e ako ana koe.
Tohutohu whaitake mo te whakamaoritanga raraunga rere rere
Whakauruhia nga mana tika
Ko te whakauru i nga mana whakahaere i roto i o whiringa i nga waahanga o te rerenga rere mo te whiwhi raraunga tika. Ko nga mana o te awhina ki te:
● whakamana i te whai huatanga o nga tohu maamaa e whakamahia ana.
● Me whakarite kia tino rite te maarama ki nga pūtau whaainga, kaore i te mahi i nga mahi toi, i te riihi ranei o te koretake.
Mārama ki te hoahoa whakamātautau
He mea nui nga whakamatautau pai mo te whakarite kia whai kiko nga raraunga e kohikohi ana koe. Whakaarohia nga mea e whai ake nei e hoahoa ana i to whakamatautau:
● Tauira Whakaora: Ko te mahi tauira tika he mea nui ki te whakaiti i te rereketanga. Hei tauira, hei whakarite ko o koutou pūtau kei roto i te aukati kotahi-pūtau he mea nui ki te tātari tika.
● Hoahoa Paewhiri: Ko te kowhiringa o nga tohu me nga fluorochmes me ahu mai i nga whaainga o te whakamatautau. Hei tauira, ki te hiahia koe ki te tātari i nga taupori o nga pūtau kano, kowhiria nga tohu e tautohu ana i nga waahanga pūtau t.
Wāhanga whakamutunga
Ko te panui me te whakamaori i nga hua o te raarangi e hiahiatia ana he maarama ki te hangarau, nga tikanga, me te horopaki koiora. Ma te whakanui i nga waahanga taapiri rerenga, te tātari raraunga matatau, me te hoahoa whakamātautau tika, ka taea e koe te whai kiko ki te tirotiro i nga kitenga pūtaiao me te whakaatu i nga whakataunga haumanu. Ahakoa e mahi ana i te rangahau mate pukupuku, te whakatikatika, te whakamaori ranei i nga raraunga taapiri mo te whakatau i nga whakaritenga e pai ake ana ki nga maimoatanga me te pai ake o nga hua o te manawanui. Mo te hunga e whai ana kia whakarei ake a raatau rangahau, tātari haumanu ranei, hua mai i HKEyBio Tukuna nga rongoā ahurei ki te whakatairanga i nga tono taatai e whakamahia ana, e whakarato ana i nga taputapu utu nui mo te whakamaarama raraunga me te tātaritanga pūtau.
FQ
Q: He aha te huringa rere?
A: Ko te huringa rere he tikanga e whakamahia ana hei tātari i nga ahuatanga o te tinana, te matūriki ranei ma te tuku i a raatau ma te kurupae laser. Ka ruha te rama rama, ka huri ki te kohi raraunga ki te rahi, te uaua, me nga tohu.
Q: Me pehea e whakamaoritia ai e au nga hua cytometry rere?
A: Ki te whakamaori i nga hua huringa rere, e aro ana ki nga raraunga marara marama (whakamua me te taha maui) me te kaha ki te tautuhi i nga taupori o runga, te uaua, me te tohu tohu.
Q: He aha nga rautaki whakaipoipo i roto i te huringa rere?
A: Ko te tarai i te taatai rere ko te tikanga mo te whakaheke i nga taupori motuhake ma te whakatakoto i nga rohe e pa ana ki nga waahanga, ki te tango ranei i etahi atu tātaritanga taipitopito.
Q: He aha te painga o te huringa rere maha?
A: Ko te huringa rere-a-roto e taea ai mo te tātaritanga o nga tohu maha i roto i tetahi tauira, e whakaatu ana i te maarama ki nga taupori o te pūtau me o raatau ahuatanga.
Q: Me pehea e taea ai te whakamahi i te taatai i te rangahau mate pukupuku?
A: Ka awhina te huringa rere i nga tohu pūtau mate pukupuku me te tātari i nga ahuatanga o te mate pukupuku, te whakarato i nga mohiotanga mo te mate diangosis, te taatai, me te aro turuki.
