Visualizzazioni: 0 Autore: Editor del sito Orario di pubblicazione: 2026-11-11 Origine: Sito
Commento del settore HKeyBio
Modelli preclinici per la previsione del rischio ADA
Serie Medicina Traslazionale 07
Pubblicato originariamente in cinese il 17 settembre 2026. Questo commento riflette le informazioni disponibili all'8 settembre 2026.
Il punto di vista di HKeyBio. L’assenza di anticorpi anti-farmaco (ADA) rilevabili in uno studio sugli animali può stabilire un basso rischio di immunogenicità umana? Un punteggio computazionale favorevole può sostituire gli esperimenti con cellule immunitarie umane? Le prove attuali supportano una conclusione più qualificata: gli strumenti preclinici aiutano a identificare i rischi, confrontare i candidati e guidare l’ottimizzazione molecolare, ma non possono ancora prevedere l’incidenza degli ADA nei pazienti con affidabilità generale.
Questa edizione della serie di medicina traslazionale di HKeyBio si concentra sulle proteine terapeutiche, in particolare sul rischio di anticorpi anti-farmaco (ADA) contro anticorpi e proteine di fusione. Queste conclusioni non dovrebbero essere estrapolate direttamente ai vaccini, alle terapie cellulari o alle terapie geniche. Basandosi su documenti normativi e ricerche disponibili per la revisione a partire dall’8 settembre 2026, esamina i modelli attuali e i loro confini traslazionali.
Riepilogo. Guida alla lettura
01 Definire l'obiettivo della previsione e interpretare i risultati del modello
02 Gli strumenti risolvono aspetti di rischio ma presentano diversi punti ciechi
03 I modelli animali e quelli emergenti hanno ciascuno applicazioni appropriate
04 Utilizzare più livelli di evidenza per le decisioni piuttosto che un punteggio composito
La formazione di ADA è un risultato dell'immunogenicità, non la sua interezza. In una tipica risposta anticorpale dipendente dalle cellule T, una proteina terapeutica viene assorbita, processata e presentata come peptidi; Le risposte delle cellule T helper possono successivamente supportare la differenziazione delle cellule B e la produzione di anticorpi. Un test individuale di solito cattura solo i passaggi selezionati. Un risultato positivo in una fase non significa necessariamente che si verificherà una risposta completa. [1,3]
Devono essere considerati tre risultati distinti: se vengono generati ADA, se possiedono attività neutralizzante e se influenzano l’esposizione, la sicurezza o l’efficacia del farmaco. Gli ADA non neutralizzanti possono comunque alterare la farmacocinetica (PK), mentre il solo rilevamento degli ADA non stabilisce un danno clinico. La prima domanda quando si interpreta un modello è quindi se misura la presentazione dell'antigene, l'attivazione cellulare o gli anticorpi che si sono effettivamente formati. [1,2]
Figura 1. Meccanismo generale di formazione dell'ADA dipendente dalle cellule T. Riprodotto da Karle et al. [3], Figura 1, sotto CC BY 4.0. © 2025 Karle et al. Creato in BioRender. Karle, A. (2025), https://BioRender.com/z1efgeo.
Metodi come NetMHCIIpan stimano il legame del peptide o la presentazione da parte di molecole di antigene leucocitario umano di classe II (HLA-II). La versione 4.3 incorpora informazioni rilevanti per HLA-DR, -DQ e -DP e può aiutare a identificare le regioni della sequenza candidata per un ulteriore esame [4]. Un punteggio di classificazione, tuttavia, non dimostra il riconoscimento delle cellule T né rappresenta una probabilità a livello di paziente di sviluppo di ADA. Le analisi dovrebbero documentare gli alleli HLA rappresentati nella popolazione target e la versione del software, garantendo che i risultati siano interpretabili e riproducibili.
La proteomica dei peptidi associati al complesso maggiore di istocompatibilità (MAPP) espone tipicamente le cellule presentanti l'antigene umano a un candidato farmaco, quindi utilizza la cromatografia liquida-spettrometria di massa tandem per identificare i peptidi associati a HLA-II. Questo misura i peptidi naturalmente elaborati e presentati, fornendo prove utili per la mappatura degli epitopi e i confronti molecola-molecola. Tuttavia, il rilevamento del peptide non dimostra la successiva attivazione delle cellule T e il mancato rilevamento può riflettere la selezione del donatore o la profondità della copertura analitica. [3]
I sistemi di cellule mononucleari del sangue periferico (PBMC) e le co-colture di cellule dendritiche/cellule T CD4+ autologhe possono misurare le risposte funzionali, inclusa la proliferazione. In uno studio del 2024 su dieci anticorpi, un test PBMC impoverito di CD8 ha rilevato risposte a quattro degli otto anticorpi con immunogenicità clinica relativamente elevata, mentre una co-coltura di cellule dendritiche/cellule T CD4+ ne ha rilevate cinque; tre erano negativi in entrambi i sistemi [5]. Questi risultati illustrano perché un singolo test sulle cellule T non può predire l’immunogenicità clinica di ogni bioterapeutico.
Le raccomandazioni sulle migliori pratiche pubblicate nel gennaio 2026 enfatizzano la selezione dei donatori, la qualità delle cellule, i controlli e i criteri di interpretazione predefiniti [6]. Per i programmi di sviluppo di farmaci in Cina, il numero dei donatori dovrebbe essere considerato insieme al modo in cui la distribuzione HLA rappresenta la popolazione di pazienti prevista. Le molecole che alterano direttamente la funzione delle cellule immunitarie necessitano di un'interpretazione particolarmente attenta: una bassa risposta del test causata dalla soppressione farmacologica non dovrebbe essere automaticamente classificata come a basso rischio di immunogenicità.
Tabella 1. Usi e principali limitazioni degli strumenti di valutazione preclinica.
Strumento o modello |
Domanda principale affrontata |
Limitazione chiave |
Previsione computazionale |
A quali regioni della sequenza dovrebbe essere data la priorità per la validazione? |
I punteggi non possono essere convertiti direttamente in tassi di incidenza ADA. |
MAPP |
Quali peptidi derivati dai farmaci vengono elaborati e presentati? |
La presentazione non equivale all'attivazione delle cellule T. |
Saggi sulle cellule T umane |
Si verificano risposte nei donatori selezionati e nelle condizioni del test? |
I risultati negativi non possono escludere il rischio clinico. |
Studi convenzionali sugli animali |
L'ADA influisce sull'interpretazione dello studio? |
L’incidenza degli ADA negli animali non equivale all’incidenza degli ADA negli esseri umani. |
Topi e organoidi umanizzati |
Il modello può aggiungere prove meccanicistiche su processi come la cooperazione tra tipi di cellule? |
L’ambito di utilizzo e le prestazioni predittive necessitano ancora di validazione. |
L'ADA negli animali convenzionali è innanzitutto una variabile che aiuta a spiegare i risultati di quello studio. L’Agenzia europea per i medicinali (EMA) rileva che le proteine umane o umanizzate possono essere riconosciute come estranee dagli animali e che l’immunogenicità animale è generalmente scarsamente predittiva dell’immunogenicità nell’uomo. Le misurazioni dell’ADA negli animali possono tuttavia aiutare a interpretare i risultati della tossicità a dosi ripetute [2]. Pertanto, la positività all’ADA nelle scimmie cynomolgus non stabilisce di per sé un elevato rischio per l’uomo e uno studio su animali ADA-negativo non è una prova della sicurezza umana.
Per gli studi preclinici sull’efficacia in vivo, un approccio più utile consiste nel seguire l’ADA nel tempo insieme ai cambiamenti nell’esposizione e nell’efficacia del farmaco. Se l'efficacia diminuisce dopo la somministrazione ripetuta, verificare innanzitutto se l'esposizione è diminuita e se l'interferenza del farmaco influisce sul test, prima di considerare una perdita di effetto correlata al meccanismo bersaglio. Un singolo risultato positivo per l’ADA al termine di uno studio solitamente non è sufficiente per stabilire che l’ADA abbia causato la variazione di efficacia. Si tratta di un approccio proposto per l'interpretazione dello studio basato sui principi normativi di cui sopra. [2]
I topi immuno-umanizzati stanno progredendo verso risposte anticorpali più complete. Uno studio di prova pubblicato nell’agosto 2026 ha utilizzato tessuto timico umano e cellule staminali ematopoietiche in sei gruppi sperimentali per studiare le risposte all’infliximab e all’interferone beta-1b. Sono stati osservati ADA farmaco-specifici, comprese alcune risposte neutralizzanti [7]. Tuttavia, sei gruppi sperimentali non equivalgono a sei donatori completamente indipendenti e sono state segnalate variabilità dei donatori e risposte non specifiche in alcuni animali di controllo. I risultati supportano ulteriori sviluppi per l’identificazione del rischio; non dimostrano una classificazione affidabile tra diversi candidati o un’accettazione normativa generale.
Gli organoidi mirano a conservare una maggiore funzionalità dei tessuti immunitari umani. Uno studio sugli organoidi delle tonsille umane del 2021 ha riprodotto le risposte anticorpali antigene-specifiche, il cambio di classe e la maturazione dell’affinità in seguito alla stimolazione con antigeni, compresi i vaccini [8]. Ciò fornisce una base di ricerca per studiare la cooperazione tra cellule T e B, ma lo studio non ha convalidato la previsione dell’incidenza dell’ADA per le proteine terapeutiche. Tradurre la capacità di risposta al vaccino in previsione del rischio farmacologico richiede ancora gruppi di farmaci, controlli positivi e negativi e una validazione indipendente.
Sia per i topi umanizzati che per gli organoidi, 'più simili a quelli umani' dovrebbe specificare quali funzioni immunitarie riproducono il modello. La copertura dei donatori, la qualità della ricostituzione immunitaria, il cambio di classe anticorpale, le risposte di fondo e la riproducibilità dovrebbero essere valutati rispetto alla domanda posta. L'etichetta 'umanizzato' da sola non stabilisce i relativi meriti di un modello.
Durante la scoperta e l'ottimizzazione, è possibile esaminare innanzitutto i rischi relativi alla sequenza e alla qualità del prodotto, utilizzando i risultati computazionali per identificare le regioni che richiedono la convalida. Dovrebbero essere considerati anche l’aggregazione, le impurità, la via di somministrazione e la popolazione di pazienti prevista. La riduzione di un punteggio derivato da una sequenza non dovrebbe andare a discapito della valutazione del prodotto nel suo complesso. [1]
Per i confronti tra candidati, lo stato della formulazione, le condizioni del donatore, i controlli e i criteri di interpretazione dovrebbero essere mantenuti il più coerenti possibile. Se MAPP identifica una regione appena presentata mentre un test sulle cellule T è negativo, esaminare prima i passaggi biologici coperti da ciascun metodo e le condizioni sperimentali, quindi decidere quale ulteriore convalida è necessaria. Due risultati negativi non dovrebbero essere considerati come 'annullanti' un risultato positivo. Anche un'ottimizzazione minima della sequenza dovrebbe essere accompagnata dalla conferma che l'attività originale e la qualità fisico-chimica vengono mantenute.
Una volta iniziato il lavoro in vivo, le misurazioni ADA dovrebbero essere valutate con letture di esposizione, efficacia e sicurezza. Anche la strategia clinica del test ADA dovrebbe essere pianificata prima di entrare in clinica. La guida 2019 della FDA statunitense differenzia le valutazioni di screening, conferma, titolo e neutralizzazione degli anticorpi e discute le prestazioni del metodo analitico [9]. I modelli di previsione del rischio e i test di rilevamento ADA rispondono a domande diverse. Questi ultimi misurano gli anticorpi nei campioni; stabilire un test di rilevamento non stabilisce la capacità di prevedere l’immunogenicità umana.
Quando i set di dati clinici ADA vengono utilizzati per confrontare molecole o sviluppare modelli, è necessario esaminare le differenze nelle popolazioni di pazienti, nei farmaci concomitanti, nei programmi di campionamento e nei metodi di analisi. Un’analisi del 2026 che combinava letture in vitro pubblicate con frequenze cliniche ADA ha esplorato le relazioni tra misurazioni meccanicistiche e risultati clinici [10]. Le associazioni retrospettive possono guidare lo sviluppo del metodo ma non sostituiscono la validazione potenziale per un nuovo candidato.
Il ruolo pratico della previsione preclinica dell’ADA è identificare tempestivamente i rischi che meritano attenzione, spiegare prove incoerenti e supportare modifiche basate sull’evidenza alle molecole o ai disegni degli studi. Al momento, il risultato più prezioso è spesso una valutazione del rischio che indichi chiaramente le prove a sostegno, l’ambito di applicabilità e le restanti incertezze.
HKeyBio è specializzato in modelli di malattie autoimmuni. Nella valutazione preclinica dell’efficacia in vivo delle terapie autoimmuni e allergiche, ci concentriamo su come i modelli, la patologia, le letture immunitarie e i test analitici si informano a vicenda. Per i programmi a dosi ripetute potenzialmente influenzati dall’ADA, il disegno dello studio può essere discusso alla luce della necessità di interpretare i cambiamenti nell’esposizione e nell’efficacia. Modelli specifici, analisi, idoneità tra specie e requisiti di implementazione dovrebbero essere confermati individualmente in base alle caratteristiche della molecola e alla fase di sviluppo.
[1] FDA. Valutazione dell'immunogenicità per prodotti proteici terapeutici. Guida per l'industria. 2014. Fonte
[2]EMA. Linee guida sulla valutazione dell’immunogenicità delle proteine terapeutiche. Revisione 1. 2017. Sezione 6: valutazione dell'immunogenicità non clinica. Fonte
[3] Karle AC, et al. Saggi MAPP per la valutazione del rischio di immunogenicità non clinica: migliori pratiche raccomandate dalla piattaforma europea di immunogenicità. Immunolo anteriore. 2025;16:1690101. doi:10.3389/fimmu.2025.1690101. Figura 1: CC BY 4.0. Fonte
[4] Nilsson JB, et al. Previsione accurata della presentazione dell'antigene HLA di classe II in tutti i loci utilizzando l'acquisizione di dati su misura e l'apprendimento automatico raffinato. Sci Avv. 2023.doi:10.1126/sciadv.adj6367. Vedi anche la documentazione DTU per le versioni del software. Fonte
[5] Walsh RE, et al. Valutazione preclinica del rischio di immunogenicità dei prodotti bioterapeutici utilizzando test sulle cellule T CD4. Immunolo anteriore. 2024;15:1406040. doi:10.3389/fimmu.2024.1406040. Fonte
[6] Tourdot S, et al. Saggi delle cellule T per la valutazione del rischio di immunogenicità non clinica: migliori pratiche raccomandate dalla piattaforma europea di immunogenicità. Immunolo anteriore. 2025;16:1723110. Pubblicato il 12 gennaio 2026. doi:10.3389/fimmu.2025.1723110. Fonte
[7] Gharaie S, et al. I topi immuno-umanizzati NeoThy™ possono produrre anticorpi anti-farmaco per supportare la valutazione dell'immunogenicità per i prodotti farmaceutici biologici. Immunolo anteriore. 2026;17:1851898. doi:10.3389/fimmu.2026.1851898. Fonte
[8] Wagar LE, et al. Modellazione delle risposte immunitarie adattive umane con organoidi tonsillari. Nat Med. 2021. doi:10.1038/s41591-020-01145-0. Fonte
[9] FDA. Test di immunogenicità di prodotti proteici terapeutici: sviluppo e convalida di test per il rilevamento di anticorpi antifarmaco. Guida per l'industria. 2019. Fonte
[10] Agnihotri S, Venkatesh A, Ramanathan M, Balu-Iyer S. Primo passo verso la previsione dell'immunogenicità clinica dei prodotti biologici utilizzando letture basate su in vitro come alternative alla sperimentazione sugli animali. J Pharm Sci. 2026;115(6):104297. doi:10.1016/j.xphs.2026.104297. Fonte
Documentazione ufficiale di NetMHCIIpan 4.3. Fonte
Autore: Dipartimento marketing di HKeyBio | Revisione scientifica: Jing Yan | Redattore: Wang Shuyan
HKeyBio, lo specialista in modelli di malattie autoimmuni, è un'organizzazione di ricerca preclinica a contratto (CRO) focalizzata sulle malattie autoimmuni e allergiche, che fornisce servizi di valutazione dell'efficacia in vivo end-to-end. Il suo team tecnico principale ha più di 20 anni di esperienza nel processo di sviluppo di farmaci autoimmuni. L'azienda è certificata ISO 9001 e gestisce una struttura di ricerca integrata nel parco industriale di Suzhou che copre ricerca molecolare e cellulare, patologia, studi su piccoli animali e test analitici, insieme a due siti di ricerca sui primati non umani a Suzhou e Guangxi. HKeyBio ha quasi 80 dipendenti e tutti i leader di progetto hanno conseguito un master o un dottorato. Il team ha accumulato esperienza nel supportare più di 500 applicazioni sperimentali di nuovi farmaci (IND) nelle malattie autoimmuni, consentendogli di affrontare in modo efficiente sfide complesse durante lo sviluppo di farmaci autoimmuni e la presentazione normativa.
· Oltre 50 modelli di primati non umani di malattie autoimmuni e allergiche
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