សេចក្តីផ្តើម
តើអ្នកធ្លាប់ឆ្ងល់ពីរបៀប លំហូរ cytometry សម្រេចបាននូវការវិភាគកោសិកាច្បាស់លាស់ និងគួរឱ្យទុកចិត្តបែបនេះ? គន្លឹះនៃលទ្ធផលត្រឹមត្រូវគឺនៅក្នុងការជួសជុលកោសិកាត្រឹមត្រូវ។ Flow cytometry អនុញ្ញាតឱ្យអ្នកស្រាវជ្រាវសិក្សាពីភាពខុសគ្នានៃលក្ខណៈកោសិកា ពីទំហំទៅអាំងតង់ស៊ីតេ fluorescence ។ ទោះយ៉ាងណាក៏ដោយ បើគ្មានការជួសជុលត្រឹមត្រូវទេ ទិន្នន័យប្រហែលជាមិនឆ្លុះបញ្ចាំងពីលក្ខណៈសម្បត្តិកោសិកាពិតនោះទេ។ នៅក្នុងអត្ថបទនេះ យើងនឹងស្វែងយល់ពីសារៈសំខាន់នៃការជួសជុលកោសិកានៅក្នុង flow cytometry ពិភាក្សាអំពីវិធីជួសជុលផ្សេងៗ និងចែករំលែកគន្លឹះសម្រាប់លទ្ធផលដ៏ល្អប្រសើរ។
តើអ្វីទៅជាការជួសជុលកោសិកានៅក្នុង Flow Cytometry?
និយមន័យនៃការជួសជុលកោសិកា
ការជួសជុលកោសិកាគឺជាដំណើរការដែលធ្វើឱ្យមានលំនឹង និងរក្សាកោសិកាដោយការពារការផ្លាស់ប្តូររចនាសម្ព័ន្ធ មុខងារ និងសមាសធាតុម៉ូលេគុលរបស់វា។ ដំណើរការនេះត្រូវបានសម្រេចដោយប្រូតេអ៊ីន លីពីត និងសមាសធាតុកោសិកាផ្សេងទៀតដែលភ្ជាប់គ្នាដោយគីមី ដោយមានប្រសិទ្ធភាព 'បង្កក' កោសិកាក្នុងស្ថានភាពបច្ចុប្បន្នរបស់វា។ នេះមានសារៈសំខាន់ជាពិសេសនៅក្នុង flow cytometry ព្រោះវាការពារការរិចរិលនៃសញ្ញាសម្គាល់កោសិកា ឬការផ្លាស់ប្តូររចនាសម្ព័ន្ធកោសិកាកំឡុងពេលវិភាគ។ តាមរយៈការជួសជុលកោសិកា អ្នកស្រាវជ្រាវអាចធានាថា លក្ខណៈនៃកោសិកានៅតែជាប់លាប់ ដែលអនុញ្ញាតឱ្យមានការវាស់វែងច្បាស់លាស់ និងទិន្នន័យដែលអាចទុកចិត្តបានក្នុងអំឡុងពេលការវិភាគ cytometry លំហូរ។
ហេតុអ្វីការជួសជុលមានសារៈសំខាន់
ការជួសជុលត្រឹមត្រូវគឺចាំបាច់ព្រោះវារក្សាភាពសុចរិតនៃប្រូតេអ៊ីនកោសិកា និងអាស៊ីត nucleic ដែលមានសារៈសំខាន់សម្រាប់ការវិភាគ cytometry លំហូរត្រឹមត្រូវ។ ប្រសិនបើកោសិកាមិនត្រូវបានជួសជុលទេ រចនាសម្ព័ន្ធ និងសញ្ញាសម្គាល់ម៉ូលេគុលរបស់វាអាចនឹងថយចុះ ឬផ្លាស់ប្តូរតាមពេលវេលា ដែលនាំឱ្យលទ្ធផលមិនគួរឱ្យទុកចិត្ត និងមិនត្រឹមត្រូវ។ Fixation ក៏ដើរតួនាទីយ៉ាងសំខាន់ក្នុងការធ្វើឱ្យកោសិកាមានស្ថេរភាពសម្រាប់ការវិភាគពហុប៉ារ៉ាម៉ែត្រ ដែលជាចំណុចខ្លាំងសំខាន់មួយនៃលំហូរ cytometry ។ វាអនុញ្ញាតឱ្យអ្នកស្រាវជ្រាវវាយតម្លៃលក្ខណៈកោសិកាជាច្រើនក្នុងពេលដំណាលគ្នា ដូចជាសញ្ញាសម្គាល់លើផ្ទៃ ប្រូតេអ៊ីនក្នុងកោសិកា និងមាតិកា DNA នៅក្នុងការពិសោធន៍តែមួយ។ បើគ្មានការជួសជុលត្រឹមត្រូវទេ ទិន្នន័យដែលទទួលបានអាចមានភាពមិនស៊ីសង្វាក់គ្នា ឬមិនពេញលេញ ដែលនាំឱ្យមានការបកស្រាយខុសនៃលទ្ធផលពិសោធន៍។
ប្រភេទនៃវិធីសាស្រ្តជួសជុលសម្រាប់លំហូរ Cytometry
ការជួសជុល Paraformaldehyde (PFA)
Paraformaldehyde (PFA) គឺជាថ្នាំជួសជុលដែលប្រើយ៉ាងទូលំទូលាយបំផុតនៅក្នុងលំហូរ cytometry ជាចម្បងដោយសារតែប្រសិទ្ធភាពរបស់វាក្នុងការរក្សាកោសិកា morphology និង antigenicity ។ វាដំណើរការដោយប្រូតេអ៊ីនដែលភ្ជាប់គ្នានៅក្នុងកោសិកា ដោយធានាថាទាំងរចនាសម្ព័ន្ធកោសិកា និងប្រូតេអ៊ីនលើផ្ទៃនៅតែនៅដដែល។ នេះធ្វើឱ្យ PFA ជាជម្រើសដ៏ល្អសម្រាប់ការរក្សាទុកនូវសញ្ញាសម្គាល់ផ្ទៃកោសិកា ជាពិសេសនៅពេលវិភាគការបញ្ចេញប្រូតេអ៊ីនលើផ្ទៃនៅក្នុងការពិសោធន៍ immunophenotyping ។
អនុសាសន៍៖
● ការផ្តោតអារម្មណ៍៖ 2-4% PFA ត្រូវបានគេប្រើជាទូទៅសម្រាប់ការជួសជុលដ៏ល្អប្រសើរ។
● ពេលវេលាជួសជុល៖ កោសិកាគួរតែត្រូវបាន incubated ក្នុង PFA រយៈពេល 15-30 នាទីនៅសីតុណ្ហភាព 2-8 °C។
● ការផ្ទុក៖ បន្ទាប់ពីជួសជុលរួច កោសិកាគួរតែត្រូវបានរក្សាទុកនៅសីតុណ្ហភាព 2-8°C សម្រាប់ការផ្ទុករយៈពេលខ្លី។ វាជារឿងសំខាន់ដែលមិនត្រូវរក្សាទុកក្រឡាថេរសម្រាប់រយៈពេលបន្ថែមព្រោះវាអាចនាំឱ្យបាត់បង់ភាពសុចរិតនៃសញ្ញាសម្គាល់។
វាមានសារៈសំខាន់ណាស់ក្នុងការជៀសវាងការជួសជុលហួសហេតុ ព្រោះការប៉ះពាល់នឹង PFA យូរអាចនាំអោយកោសិការអូតូហ្វ្លុយអូរីស និងរំខានដល់ស្នាមប្រឡាក់ និងការវិភាគជាបន្តបន្ទាប់។ តែងតែប្រើរយៈពេលដែលត្រូវការតិចតួចបំផុតសម្រាប់ការជួសជុល។
ការកែតម្រូវអេតាណុល
ការជួសជុលអេតាណុលត្រូវបានប្រើជាទូទៅនៅពេលដែលការផ្តោតអារម្មណ៍នៃការវិភាគគឺទៅលើមាតិកា DNA ដូចជាក្នុងការសិក្សាវដ្តកោសិកា។ អេតាណុលជាភ្នាក់ងារខ្សោះជាតិទឹកដែលធ្វើការដោយការជ្រៀតចូលភ្នាសកោសិកា និងរក្សា DNA ក្នុងកោសិកា។ នេះធ្វើឱ្យការជួសជុលអេតាណុលមានប្រយោជន៍ជាពិសេសសម្រាប់ការវិភាគផ្អែកលើ DNA និងការវិភាគ cytometry លំហូរ ដែលដំណាក់កាលនៃវដ្តកោសិកា ឬមាតិកា DNA កំពុងត្រូវបានពិនិត្យ។
អនុសាសន៍៖
● ការប្រមូលផ្តុំ៖ ជាធម្មតា អេតាណុល 70-100% ត្រូវបានប្រើប្រាស់។
● ពេលវេលាជួសជុល៖ ការជួសជុលអេតាណុលជាធម្មតាត្រូវការរយៈពេល 10-15 នាទីដើម្បីទទួលបានលទ្ធផលល្អបំផុត។
ការជួសជុលអេតាណុលគឺល្អសម្រាប់ការរក្សាដំណាក់កាលវដ្ដកោសិកា ហើយវាអាចត្រូវបានប្រើរួមជាមួយថ្នាំពណ៌ដែលចង DNA ដូច��ា propidium iodide (PI) សម្រាប់ការវិភាគវដ្តកោសិកា។
ការជួសជុលមេតាណុល
មេតាណុល គឺជាថ្នាំជួសជុលដែលប្រើជាទូទៅមួយផ្សេងទៀត ជាពិសេសសម្រាប់ការវិភាគលើកោសិកា។ វាដំណើរការដោយការជ្រាបចូលទៅក្នុងភ្នាសកោសិកា និងធ្វើឱ្យរចនាសម្ព័ន្ធខាងក្នុងរបស់កោសិកាមានស្ថេរភាព។ ខណៈពេលដែលមេតាណុលមានប្រសិទ្ធភាពក្នុងការរក្សាប្រូតេអ៊ីនកោសិកា និងអង់ទីហ្សែន វាអាចបណ្តាលឱ្យមានការរួញកោសិកា ដែលអាចប៉ះពាល់ដល់ការបកស្រាយនៃលក្ខណៈពិសេសមួយចំនួន ដូចជាទំហំកោសិកា និងរូបសណ្ឋាន។
អនុសាសន៍៖
● ការប្រមូលផ្តុំ៖ ជាធម្មតា មេតាណុល 90-100% ត្រូវបានប្រើប្រាស់។
● ពេលវេលាជួសជុល៖ 10-15 នាទីជាធម្មតាគ្រប់គ្រាន់។
ការជួសជុលមេតាណុលត្� វបានប្រើជាញឹកញាប់នៅពេលសិក្សាអំពីប្រូតេអ៊ីនក្នុងកោសិកា ជាពិសេសនៅព
ថ្នាំបំប៉នផ្សេងទៀត (ឧទាហរណ៍ Formalin)
Formalin ដែលជាដំណោះស្រាយនៃ formaldehyde នៅក្នុងទឹកគឺជាសារធាតុជួសជុលមួយផ្សេងទៀតដែលត្រូវបានប្រើនៅក្នុង cytometry លំហូរ ទោះបីជាវាជារឿងធម្មតាតិចជាង PFA ក៏ដោយ។ Formalin ត្រូវបានគេប្រើយ៉ាងទូលំទូលាយនៅក្នុង histology និង immunohistochemistry ដែលជាកន្លែងដែលវាមានប្រសិទ្ធភាពរក្សាសំណាកជាលិកាសម្រាប់ការវិភាគមីក្រូទស្សន៍។ ទោះបីជាសារធាតុ formalin អាចរក្សារចនាសម្ព័ន្ធកោសិកាក៏ដោយ ជាទូទៅវាមិនត្រូវបានណែនាំសម្រាប់ flow cytometry ទេ លុះត្រាតែធ្វើការជាមួយសំណាកជាលិកាថេរព្រោះវាអាចរំខានដល់ការតម្រៀបកោសិកា និងកម្មវិធី fluorescence មួយចំនួន។ ការជួសជុលទម្រង់បែបបទគឺសមបំផុតសម្រាប់សំណាកជាលិកា មិនមែនសម្រាប់កោសិកាបុគ្គលនោះទេ។
ជួសជុល |
ការប្រមូលផ្តុំ |
ពេលវេលាជួសជុល |
ការប្រើប្រាស់ដែលបានណែនាំ |
Paraformaldehyde (PFA) |
2-4% |
15-30 នាទី។ |
ល្អបំផុតសម្រាប់ការរក្សាទុក សញ្ញាសម្គាល់ផ្ទៃក្រឡា; ធម្មតាសម្រាប់ immunophenotyping |
អេតាណុល |
70-100% |
10-15 នាទី។ |
ល្អបំផុតសម្រាប់ការវិភាគខ្លឹមសារ DNA និងការសិក្សាអំពីវដ្តកោសិកា |
មេតាណុល |
90-100% |
10-15 នាទី។ |
សមស្របសម្រាប់ការវិភាគប្រូតេអ៊ីន intracellular; អាចបណ្តាលឱ្យមានការបង្រួមកោសិកា |
ហ្វ័រម៉ាលីន |
10% (formaldehyde) |
ប្រែប្រួល (អាស្រ័យលើជាលិកា) |
ជាទូទៅត្រូវបានប្រើសម្រាប់សំណាកជាលិកាថេរ មិនមែនសម្រាប់កោសិកានីមួយៗទេ។ |
ការណែនាំជាជំហាន ៗ ដើម្បីជួសជុលកោសិកាសម្រាប់លំហូរ Cytometry
ការរៀបចំគំរូក្រឡា
មុនពេលជួសជុលវាចាំបាច់ណាស់ក្នុងការញែកកោសិកាចេញពីជាលិកាឬគំរូឈាម។ Centrifugation គឺជាវិធីសាស្រ្តទូទៅបំផុតដែលប្រើសម្រាប់ការប្រមូលផ្តុំកោសិកានៅក្នុងការព្យួរមួយ។ វាក៏សំខាន់ផងដែរក្នុងការលាងសម្អាតកោសិកាឱ្យបានហ្មត់ចត់ ដើម្បីយកឧបករណ៍ផ្ទុកវប្បធម៌ ឬសារធាតុកខ្វក់ដែលនៅសេសសល់ ដែលអាចរំខានដល់ដំណើរការជួសជុល។
1. Cell Isolation: ប្រើវិធីសាស្រ្តឯកោស្តង់ដារដូចជា centrifugation ឬ cell sorting ដើម្បីបំបែកកោសិកាដែលចាប់អារម្មណ៍។
2. ការបោកគក់៖ លាងសម្អាតកោសិកាជាមួយនឹងអំបិល phosphate-buffered saline (PBS) ដើម្បីយកសារធាតុដែលនៅសេសសល់ និងសារធាតុកខ្វក់ដែលអាចប៉ះពាល់ដល់ដំណើរការជួសជុល។
នីតិវិធីជួសជុល
នៅពេលដែលក្រឡាត្រូវបានរៀបចំ ជំហានបន្ទាប់គឺត្រូវបន្ថែមសារធាតុជួសជុលទៅការព្យួរក្រឡា។ ឧបករណ៍ជួសជុលដែលប្រើជាទូទៅបំផុតសម្រាប់លំហូរ cytometry គឺជាដំណោះស្រាយ 2-4% PFA ។
1. បន្ថែមសារធាតុ fixative ទៅនឹងការព្យួរកោសិកា ដោយធានាថាវាត្រូវបានលាយបញ្ចូលគ្នាយ៉ាងល្អ។
2. ភ្ញាស់កោសិកាជាមួយថ្នាំជួសជុលរយៈពេល 15-30 នាទីនៅសីតុណ្ហភាព 2-8 អង្សាសេ។
3. បនា្ទាប់ពីភ្ញាស់រួច លាងកោសិកាពីរដងជាមួយ PBS ដើម្របីយកសារធាតុលើស។
ជំហានក្រោយការជួសជុល
បន្ទាប់ពីការជួសជុលកោសិកាត្រូវតែត្រូវបានដោះស្រាយយ៉ាងប្រុងប្រយ័ត្ន។ ប្រសិនបើត្រូវការការវិភាគបន្ថែម កោសិកាគួរតែត្រូវបានប្រឡាក់មុនពេលវិភាគ។ ប្រសិនបើអ្នកមានគម្រោងរក្សាទុកកោសិកាសម្រាប់ការវិភាគនាពេលអនាគត សូមផ្អាកពួកវាឡើងវិញក្នុងសតិបណ្ដោះអាសន្នសមស្រប ហើយរក្សាទុកពួកវានៅសីតុណ្ហភាព 2-8°C។ ជៀសវាងការទុកកោសិកានៅក្នុងឧបករណ៍ជួសជុលក្នុងរយៈពេលយូរ ព្រោះការជួសជុលច្រើនពេកអាចនាំឱ្យមានការបង្កើន autofluorescence និងកាត់បន្ថយគុណភាពសញ្ញា។
គន្លឹះសម្រាប់ការជួសជុលល្អបំផុតនៅក្នុង Flow Cytometry
ជៀសវាងការជួសជុលលើស
ការជួសជុលហួសកម្រិតកើតឡើងនៅពេលដែលកោសិកាត្រូវបានប៉ះពាល់នឹងសារធាតុជួសជុលយូរពេក ដែលអាចបណ្តាលឱ្យមានការភ្ជាប់គ្នានៃប្រូតេអ៊ីនកោសិកាច្រើនពេក និងធ្វើឱ្យខូចគុណភាពនៃទិន្នន័យ។ នេះអាចនាំអោយមាន autofluorescence, កាត់បន្ថយការចងអង្គបដិប្រាណ និងការវាស់ស្ទង់ cytometry លំហូរមិនត្រឹមត្រូវ។ សូមពិនិត្យមើលពេលវេលាជួសជុលដែលបានណែនាំសម្រាប់ប្រភេទកោសិកាជាក់លាក់របស់អ្នក និងការពិសោធន៍ជានិច្ច ដើម្បីជៀសវាងការជួសជុលលើស។
ពេលវេលាជួសជុលធៀបនឹងប្រភេទគំរូ
ពេលវេលាជួសជុលល្អបំផុតអាចប្រែប្រួលអាស្រ័យលើប្រភេទក្រឡា និងលក្ខណៈនៃការពិសោធន៍។ ជាឧទាហរណ៍ កោសិកាភាពស៊ាំអាចត្រូវការពេលវេលាជួសជុលខ្លីជាងគំរូជាលិកា។ លៃតម្រូវពេលវេលាជួសជុលដោយផ្អែកលើតម្រូវការជាក់លាក់នៃប្រភេទគំរូ។ សម្រាប់ការវិភាគប្រូតេអ៊ីនលើផ្ទៃ ពេលវេលាជួសជុលខ្លីជាង (10-15 នាទី) ជាធម្មតាគ្រប់គ្រាន់។ សម្រាប់ការស្នាមប្រឡាក់ក្នុងកោសិកា ឬការវិភាគ DNA ពេលវេលាជួសជុលយូរជាងនេះអាចត្រូវបានទាមទារ។
ស្នាមប្រឡាក់បន្ទាប់ពីការជួសជុល
បន្ទាប់ពីជួសជុលកោសិកា ស្នាមប្រឡាក់ជាមួយអង្គបដិបក្ខ ឬថ្នាំជ្រលក់ fluorescent គឺជាជំហានដ៏សំខាន់មួយក្នុងការវិភាគ cytometry លំហូរ។ ថ្នាំជ្រលក់ពណ៌ fluorescent មួយចំនួន ជាពិសេសថ្នាំជ្រលក់តង់ដេម អាចមានភាពរសើបចំពោះការជួសជុល និងអាចបង្ខូចទ្រង់ទ្រាយ ប្រសិនបើកោសិកាត្រូវបានជួសជុលហួសកម្រិត។ ដើម្បីទទួលបានលទ្ធផលស្នាមប្រឡាក់ល្អបំផុត វាត្រូវបានណែនាំអោយប្រឡាក់កោសិកាមុនពេលជួសជុលនៅពេលណាដែលអាចធ្វើទៅបាន។ នេះអាចជួយការពារការរិចរិលពណ៌ និងធានាបាននូវសញ្ញា fluorescence កាន់តែខ្លាំង។
ការរក្សាទុកកោសិកាថេរសម្រាប់លំហូរ Cytometry
ការផ្ទុករយៈពេលខ្លី
សម្រាប់ការផ្ទុករយៈពេលខ្លី កោសិកាថេរអាចរក្សាទុកក្នុងទូទឹកកកនៅសីតុណ្ហភាព 2-8°C។ នេះគឺល្អនៅពេលដែលអ្នកមានគម្រោងវិភាគកោសិកាក្នុងរយៈពេលមួយថ្ងៃ ឬពីរថ្ងៃបន្ទាប់ពីការជួសជុល។ រក្សាទុកកោសិកាថេរនៅក្នុងទីងងឹតជានិច្ច ដើម្បីការពារការលេចចេញនូវរូបភាពដែលអាចប៉ះពាល់ដល់សញ្ញា fluorescent ។
ការផ្ទុករយៈពេលវែង
សម្រាប់ការផ្ទុករយៈពេលវែង កោសិកាអាចត្រូវបានបង្កកនៅក្នុងប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយដែលរក
កំហុសទូទៅដែលត្រូវជៀសវាងក្នុងការជួសជុលកោសិកាសម្រាប់លំហូរ Cytometry
ផលប៉ះពាល់នៃការជួសជុលមិនត្រឹមត្រូវ
ការជួសជុលមិនត្រឹមត្រូវអាចនាំឱ្យមានបញ្ហាជាច្រើន រួមទាំង autofluorescence កាត់បន្ថយការភ្ជាប់អង្គបដិប្រាណ និងលទ្ធភាពជោគជ័យនៃកោសិកា។ បញ្ហាទាំងនេះអាចជះឥទ្ធិពលយ៉ាងខ្លាំងទៅលើភាពត្រឹមត្រូវ និងភាពជឿជាក់នៃលទ្ធផល cytometry លំហូរ។ តែងតែផ្ទៀងផ្ទាត់ពិធីការជួសជុលសម្រាប់ប្រភេទគំរូជាក់លាក់របស់អ្នក ហើយត្រូវប្រ� ដថាលក្ខខណ្ឌនៃការជួសជុលគឺសមរម្យសម្រាប់ប្រភេទក្រឡា និងសញ្ញាសម្គាល់ដែលកំពុងត្រូវបានវិភាគ។
ការជ្រើសរើស Fixative ត្រឹមត្រូវសម្រាប់កម្មវិធីរបស់អ្នក។
ការជ្រើសរើសឧបករណ៍ជួសជុលដែលសមរម្យសម្រាប់ការពិសោធន៍ cytometry លំហូររបស់អ្នកគឺមានសារៈសំខាន់សម្រាប់ការទទួលបានលទ្ធផលដែលអាចទុកចិត្តបាន និងត្រឹមត្រូវ។ ឧបករណ៍ជួសជុលផ្សេងគ្នាគឺសមស្របជាងសម្រាប់កម្មវិធីផ្សេងៗ។ ជាឧទាហរណ៍ PFA ត្រូវបានគេប្រើជាទូទៅសម្រាប់ការវិភាគប្រូតេអ៊ីនលើផ្ទៃ ខណៈពេលដែលអេតាណុលគឺល្អសម្រាប់ការសិក្សាដោយផ្អែកលើ DNA។ មុននឹងចាប់ផ្តើមការពិសោធន៍ សូមស្រាវជ្រាវឧបករណ៍ជួសជុលដ៏ល្អបំផុតសម្រាប់កម្មវិធីជាក់លាក់របស់អ្នក ហើយកែតម្រូវពិធីការជួសជុលឱ្យសមស្រប។
សេចក្តីសន្និដ្ឋាន
ការជួសជុលកោសិកាត្រឹមត្រូវគឺចាំបាច់សម្រាប់ការសម្រេចបាននូវការវិភាគ កometry លំហូរដោយជោគជ័យ។ វាជួយរក្សារចនាសម្ព័នភធកោសិកា និងធានានូវភាពសុចរិតនៃប្រូតេអ៊ីន និង DNA ។ ដោយអនុវត្តតាមពិធីការជួសជុលត្រឹមត្រូវ និងជៀសវាងការជួសជម្ហួសហេតុ អ្នកស្រាវជ្រាវអាចបង្កើនភាពត្រឹមត្រូវ និងភាពជឿជាក់នៃទិន្នន័យ។ ការជ្រើសរើសឧបករណ៍ជួសជុលដែលសមរម្យសម្រាប់ការពិសោធន៍របស់អ្នកធ្វើអោយប្រសើរឡើងនូវគុណភាពទាំងមូលនៃលទ្ធផលរបស់អ្នក។ ការអនុវត្តការអនុវត្តល្អបំផុតទាំងនេះធានាថាការវិភាគ cytometry លំហូររបស់អ្នកផ្តល់នូវការយល់ដឹងស៊ីគ្នា និងអាចផលិតឡើងវិញបានចំពោះមុខងារកោសិកា។
ការជួសជុលកោសិកាត្រឹមត្រូវដើរតួនាទីយ៉ាងសំខាន់ក្នុងលំហូរ cytometry និងផលិតផលពី HKeybio ផ្តល់ជូននូវដំណោះស្រាយដែលអាចទុកចិត្តបាន។ ការផ្តល់ជូនរបស់ពួកគេធានានូវលទ្ធផលដែលមានគុណភាពខ្ពស់ និងត្រូវបានជឿទុកចិត្តដោយអ្នកស្រាវជ្រាវទូទាំងពិភពលោកសម្រាប់ការវិភាគកោសិកាត្រឹមត្រូវ។
សំណួរគេសួរញឹកញាប់
សំណួរ៖ តើអ្វីជាសារៈសំខាន់នៃការជួសជុលកោសិកានៅក្នុងលំហូរ cytometry?
ចម្លើយៈ ការជួសជុលកោសិកាគឺមានសារៈសំខាន់ណាស់ក្នុងលំហូរស៊ីតូមេទ្រី ដោយសារវារក្សារចនាសម្ព័ន្ធកោសិកា និងធានានូវភាពសុចរិតនៃប្រូតេអ៊ីន និង DNA សម្រាប់ការវិភាគត្រឹមត្រូវ។
សំណួរ៖ តើកោសិកាត្រូវជួសជុលរយៈពេលប៉ុន្មានសម្រាប់លំហូរ cytometry?
ចម្លើយ៖ ជាធម្មតាកោសិកាគួរតែត្រូវបានជួសជុលរយៈពេល 15-30 នាទីជាមួយនឹងដំណោះស្រាយ 2-4% paraformaldehyde (PFA) ដើម្បីរក្សាភាពសុចរិតនៃកោសិកា។
សំណួរ: តើខ្ញុំអាចប្រើអេតាណុលសម្រាប់ការជួសជុលកោសិកាក្នុងលំហូរ cytometry បានទេ?
ចម្លើយ៖ បាទ ការជួសជុលអេតាណុល�ា�រូវប�គ្រងសមស្របអាចធ្វើឲ្យលទ្ធផលប្រសើរឡើង និងការពារការខូចខាតថ្លើមបន្ថែមទៀត។ ការព្យាបាលជំងឺក្រិនថ្លើមអាស្រ័យលើមូលហេតុចម្បងរបស់វា៖
សំណួរ: តើមានអ្វីកើតឡើងប្រសិនបើកោសិកាត្រូវបានជួសជុលលើសនៅក្នុង cytometry លំហូរ?
ចម្លើយ៖ ការជួសជុលលើសអាចបណ្តាលឱ្យមានតំណភ្ជាប់ឆ្លងកាត់ច្រើនហួសហេតុ ដែលនាំឱ្យ autofluorescence និងការភ្ជាប់អង្គបដិប្រាណមិនល្អ ដែលអាចប៉ះពាល់ដល់លទ្ធផលលំហូរ cytometry ។
